Validar el uso de fibrina rica en plaquetas y leucocitos (L-PRF) en caballos para aumentar los procesos de regeneración tisular

Abstract

Una segona generació de PRP ha estat proposada com a biomaterial per cirurgia humana. Aquesta substancia es nomenada Fibrina Rica en Plaquetes i Leucòcits (L-PRF) i s’obté de sang venosa recollida en tubs sense anticoagulants i centrifugada d’immediat a baixes acceleracions. Durant el procés hi ha activació plaquetària quan les plaquetes entren en contacte amb el vidre dels tubs i la fibrina polimeritza. Algunes cèl·lules queden atrapades dins d’aquesta malla de fibrina, predominantment plaquetes i leucòcits I part de les investigacions en aquesta tesi porten a conclusions importants sobre el comportament d’aquests continguts en el rol de la curació tissular. Aquests estudis preliminars en sang equina han mostrat que varis factors de creixement que inclouen PDGF-BB, IGF-1, TGF-β1 son secretats dels coàguls de manera sostinguda durant les 2 ó 3 setmanes d’incubació estudiades, que aquests coàguls poden ser modelats en diferents formes i adaptats per diferents aplicacions dins del camp de cirurgia actuant com a malles per augmentar la curació dels teixits. Encara que el L-PRF s’utilitza sovint en cirurgia maxil·lofacial en humans i per el tractament d’úlceres cròniques encara no hi ha informació bàsica sobre aquest biomaterial dins del camp de la medicina regenerativa equina.

Aquests estudis contribueixen a esbrinar la composició i biologia bàsica del L-PRF en cavalls i dona suport a la informació biològica traslacional a humans i altres mamífers. TNF-α, IL-4 així com IL-1ra varen ser produïts per leucòcits dels coàguls del PRF clots, mentre que PDGF-BB i TGF-β1 varen ser produïts per desgranulació plaquetària encara que ambdues troballes suggereixin de que tots dos factors de creixement van ser també produïts per leucòcits atrapats dins la malla de fibrina del coàguls de PRF. Això demostra el rol fonamental dels leucòcits dins de la cicatrització tant sigui induïda com modificada per coàguls de PRF dins dels mamífers. A més es molt important considerar que el TNF-α hauria de ser considerat com una citocina regula tòria e inclús beneficiosa dins dels coàguls ja que augmenta la síntesi de citocines antiinflamatòries d’aquest biomaterial. Les hipòtesi varen ser corroborades ja que els coàguls de PRF van produir i deixar anar citocines i factors de creixement en el temps i pràcticament no es van detectar diferències en els patrons de secreció proteica entre els diferents protocols de elaboració avaluats. Es recomana l’ús clínic dels sobre nadants del procés de producció ja que son una font molt important en factors de creixement anabòlics.

A second generation of PRP has been recently proposed as a biomaterial for human surgery. This substance is named leukocyte and platelet rich fibrin (L-PRF) and is obtained from venous blood collected in tubes without anticoagulant and immediately centrifuged at low acceleration. This is a production process in which platelet activation occurs gradually when platelets contact with the tube wall and fibrin polymerizes. Several cells are trapped within the fibrin mesh, predominantly platelets and leucocytes and investigations performed have led to elucidate the role of these components in the tissue healing process. These preliminary studies in equine blood have shown that several growth factors including PDGF-BB, IGF-1, TGF-β1 are released from the clots in a sustained manner over a period of 2-3 weeks of incubation, that the clots can be moulded into different shapes and adapted for potential different uses in surgery acting as scaffolds for wound healing augmentation. Although, L-PRF is frequently used in human maxillofacial surgery and for the treatment of recalcitrant chronic wounds there is no basic or clinical information about this biomaterial in equine regenerative medicine. This study contributes about PRF basic biology in horses and supports biologic translational information to humans and other mammals. TNF-α, IL-4 and IL-1ra were produced by resident leukocytes from PRF clots, whereas PDGF-BB and TGF-β1 were mostly produced by platelet degranulation, although these findings were suggestive that both GF were also produced by leukocytes enmeshed in PRF clots. These findings demonstrate a paramount role of leukocytes in wound healing, either induced or modified by PRF clots in mammals. Furthermore, it is important to consider that TNF-α should be considered a regulatory and consequently beneficial cytokine in PRF clots, because it increases the release of anti-inflammatory cytokines from this biomaterial. The hypotheses were corroborated, because PRF clots produced and released cytokines and GFs over a long term and no practical differences for protein release pattern were noticed between equine PRF clots obtained with the two centrifugation protocols evaluated. However, it is recommendable to incorporate the clinical use of serum supernatant which is a by-product obtained during PRF processing, because it is extremely rich in anabolic GF.