Universitat de Lleida
Verdaguer Autonell, Joan
2019-07-01
253 p.
Universitat de Lleida. Departament de Medicina Experimental
La diabetis del tipus 1 es una malaltia autoimmune caracteritzada per la destruccio de les cel・lules b dels illots pancreatics. Els limfocits T son els maxims responsables d'aquesta destruccio, i encara que els limfocits B infiltren els illots igual que els anteriors, la funcio que exerceixen es encara desconeguda. L’objectiu principal d’aquest projecte de recerca ha estat descriure el fenotip diabetogenic dels limfocits B. Amb aquesta intencio, s’han utilitzat dos ratolins transgenics de NOD amb diferencies evidents en el desenvolupament de la DT1. D'una banda, es va utilitzar el 116CNOD, que desenvolupa la malaltia mes tard i amb una incidencia mes baixa que en el ratoli NOD; i, d'altra banda, es va analitzar el ratoli transgenic NOD. PerIg, el qual desenvolupa la malaltia a una edat molt mes prematura i amb major incidencia que els NOD. Aixi mateix, es va decidir analitzar en els ratolins NOD. PerIg. Per-/- l'impacte de l'absencia de l’autoantigen dels limfocits B en aquest perfil diabetogenic. L'analisi dels limfocits B dels models NOD, 116C-NOD i NOD. PerIg va demostrar que existeix un perfil diabetogenic en els limfocits B de NOD. PerIg, el qual es caracteritza per la seva gran expressio de molecules coestimuladores, la seva alta capacitat de proliferacio davant de diferents estimuls, l’alta produccio de citoquines, i la seva habilitat d'activar els limfocits T. Pel que fa al model NOD. PerIg. Per-/-, encara que s'observava un retard en la incidencia en aquests ratolins comparat amb el ratoli NOD. PerIg, no es van trobar canvis evidents en el fenotip diabetogenic, fet que insinua el reconeixement d'un altre autoantigen per part dels limfocits B de NOD. PerIg. Per-/-. D'altra banda, es va observar que un fragment de la sequencia aminoacidica de la periferina (altament conservada en els Filaments Intermedis del citoesquelet) es comportava com un DAMP, induint la produccio i secrecio de citocines proinflamatories en monocits de ratolins. Per ultim, es va detectar que aquesta mateixa sequencia de la periferina mostrava una capacitat apoptotica capac d'induir la mort en diferents tipus de cel・lules, i de diferents especies, com en pollastres, ratolins i humans.
La diabetes del tipo 1 es una enfermedad autoinmune, caracterizada por la destruccion de las celulas b de los islotes pancreaticos. Los linfocitos T son los maximos responsables de esta destruccion, y aunque los linfocitos B infiltran los islotes igual que los anteriores, la funcion que desempenan es aun desconocida. El presente proyecto de investigacion ha tenido como objetivo principal describir el fenotipo diabetogenico de los linfocitos B, utilizando para ello dos ratones transgenicos de NOD con diferencias evidentes en el desarrollo de la DT1. Por un lado, se utilizo el 116CNOD, que desarrolla la enfermedad mas tarde y con una menor incidencia que en el raton NOD; y, por otro lado, se analizo el raton transgenico NOD-PerIg, el cual desarrolla la enfermedad a una edad mucho mas temprana y con mayor incidencia que los NOD. Asimismo, se decidio analizar en los ratones NOD-PerIg.Per-/- el impacto en este perfil diabetogenico de los linfocitos B por la ausencia de su autoantigeno diana. El analisis de los linfocitos B de los modelos NOD, 116C-NOD y NOD-PerIg demostro que existe un perfil diabetogenico en los linfocitos B de NOD-PerIg, el cual se caracteriza por su gran expresion de moleculas coestimuladoras, su alta capacidad de proliferacion frente a diferentes estimulos, su alta produccion de citoquinas, y su habilidad de activar a los linfocitos T. En cuanto al modelo NOD-PerIg.Per-/-, aunque se observaba un retraso en la incidencia en estos ratones comparado con el raton NOD-PerIg, no se encontraron cambios evidentes en el fenotipo diabetogenico, hecho que sugiere el reconocimiento de otro autoantigeno por parte de los linfocitos B de NOD-PerIg.Per-/-. Por otro lado, se observo que un fragmento de la secuencia aminoacidica de la periferina (altamente conservada en los Filamentos Intermedios del citoesqueleto) se comportaba como un DAMP, induciendo la produccion y secrecion de citoquinas proinflamatorias en leucocitos de ratones, y humanos. Por ultimo, se detecto que esta misma secuencia de la periferina mostraba una capacidad apoptotica capaz de inducir la muerte en diferentes tipos de celulas, y de diferentes especies, como en pollos, ratones y humanos.
Type 1 diabetes is an autoimmune disease characterized by the destruction of the b cells of the pancreatic islets. Although the lymphocytes T are the maximum responsible for this destruction, B lymphocytes infiltrate the islets just like the previous ones, but their function remains unknown. The main objective of this work was to describe the diabetogenic phenotype of B lymphocytes, using two transgenic mice of NOD with different development of DT1. On the one hand, the 116C-NOD mouse shows a delay in the onset of DT1 and a decreased incidence of the disease than in the NOD mouse. On the other hand, the transgenic NODPerIg mouse was analyzed, which develops the disease at an earlier age and with greater incidence than NOD. Furthermore, the effects of the absence of the autoantigen in the diabetogenic profile of B lymphocytes was studied in NOD-PerIg.Per-/- mice. The analysis of B lymphocytes of the models NOD, 116C-NOD and NOD. PerIg showed that B lymphocytes of NOD. PerIg have a diabetogenic profile characterized by their great expression of costimulatory molecules, their high proliferation capacity against different stimuli, their cytokine production and their ability to activate T lymphocytes. Regarding the NOD-PerIg.Per-/- model, although there was a delay in the incidence in these mice compared with the mouse NOD-PerIg, no obvious changes were found in the diabetogenic phenotype, a fact that could imply the recognition of another autoantigen by the B lymphocytes of NOD-PerIg.Per-/-. On the other hand, it was observed that part of the aminoacidic sequence of Peripherin (highly conserved in Intermediate Filaments) behaved like a DAMP, inducing the production and secretion of proinflammatory cytokines in mouse monocytes. Also, it was found that the same sequence of peripherin showed an apoptotic capacity, capable of inducing death in different types of cells, and different species, as chickens, mice and humans.
Diabetes; Periferina; Linfòcits B; Linfocitos B; Peripherin; B lymphocytes
616 - Pathology. Clinical medicine
Immunologia
ADVERTIMENT. L'accés als continguts d'aquesta tesi doctoral i la seva utilització ha de respectar els drets de la persona autora. Pot ser utilitzada per a consulta o estudi personal, així com en activitats o materials d'investigació i docència en els termes establerts a l'art. 32 del Text Refós de la Llei de Propietat Intel·lectual (RDL 1/1996). Per altres utilitzacions es requereix l'autorització prèvia i expressa de la persona autora. En qualsevol cas, en la utilització dels seus continguts caldrà indicar de forma clara el nom i cognoms de la persona autora i el títol de la tesi doctoral. No s'autoritza la seva reproducció o altres formes d'explotació efectuades amb finalitats de lucre ni la seva comunicació pública des d'un lloc aliè al servei TDX. Tampoc s'autoritza la presentació del seu contingut en una finestra o marc aliè a TDX (framing). Aquesta reserva de drets afecta tant als continguts de la tesi com als seus resums i índexs.
