Estudios

Abstract

Desde hace una década, el tratamiento farmacológico de la trombosis venosa profunda se realiza con heparinas<br/>de bajo peso molecular (HBPM) (3-9 kD).<br/>La administración transdérmica de fármacos presenta ventajas frente a las vías convencionales, como la<br/>eliminación del efecto de primer paso intestinal y hepático; la posibilidad de administrar a velocidad constante<br/>medicamentos de forma no invasiva, etc. Pero esta vía de administración no es generalizable a todos los fármacos,<br/>puesto que deben reunir una serie de características para que las cantidades que penetran, proporcionen<br/>concentraciones plasmáticas eficaces.<br/>Se ha seleccionado la Bemiparina (HBPM de PM medio=3.6 kD), porque a priori, se piensa que el estudio<br/>puede proporcionar resultados útiles para la prevención de la enfermedad tromboembólica, con todas las ventajas<br/>que la nueva vía de administración aportaría en este campo terapéutico.<br/>Los objetivos son:<br/>- Determinación de la capacidad de penetración cutánea in vitro e in vivo de Bemiparina,<br/>- Valoración de las muestras a través del método que figura en la Farmacopea Española 2002 y búsqueda de dos<br/>métodos alternativos.<br/>La metodología a seguir fue la siguiente:<br/>- "Ensayos in vitro": el sustrato biológico es piel humana. Los ensayos se realizan en células de difusión<br/>estandarizadas, de dos compartimentos, dado y receptor, entre los cuales se dispone la membrana. En el dador se<br/>dispone la formulación de Bemiparina a analizar. En el compartimento receptor se dispone una solución al 0.9% de<br/>NaCl.<br/>- "Estudios in vivo": se aplicará una capa de aproximadamente 1 mm de espesor de la formulación seleccionada<br/>en la fase 1 en una zona dorsal del animal (rata Wistar macho de 250-300 g de peso).<br/>A los animales se les implanta una cánula de silicona en la vena yugular, que permite la toma de muestras de<br/>sangre.<br/>La valoración de las muestras se realizará mediante la determinación de la actividad anti-Xa (método que figura<br/>en la Farmacopea Española 2002).<br/>Como alternativa se estudia la posibilidad de dos métodos de CLAE:<br/>1. Determinación de Bemiparina sódica por detección UV<br/>2. Determinación de Bemiparina sódica por fluorescencia, a través del disacárido producido por una<br/>digestión enzimática.

For a decade, the pharmacologic treatment of deep vein thrombosis (DVT) consists in<br/>the administration of low molecular weight heparin (LMWH) (3-9 kD).<br/>Transdermal administration of xenobiotics has some advantages in comparison to the<br/>conventional routes, althought this route isn´t generalizable for all xenobiotics.<br/>We have select the BEMIPARIN (3.6 kD) out of all LMWH, because at the beginning,<br/>we thik the study can get useful results for the prevention of thromboembolic disease,<br/>with all advantages that the new administration way could contribute at this therapeutic<br/>field.<br/>The objectives of this study are:<br/>- Determination of the capacity of Bemipain´s cutaneous penetration in vitro e in<br/>vivo.<br/>- Analyzation of the samples by the method of the King Spanish Pharmacopeia,<br/>2002, and search of two alternating methods.<br/>For the in vitro trials, we employ human skin as biologic membrane. The experiments<br/>carry out in standarizaded diffusion cells. These cells have two compartiments, donor<br/>and receptor.<br/>For the in vivo trials, the animal employed is Wistar male rat (250-300 g of weight). We<br/>apply on the back zone a cape of 1 mm of thickness, of the formulation selected in the<br/>in vitro trials. Previous the day of experiment, we implant a cannula of silicone in the<br/>jugular vein for the taking of blood samples.<br/>The samples are analyzated by the determination of anti-Xa activity (method of King<br/>Spanish Pharmacopeia, 2002), and as alternative we study the possibility of employ two<br/>methods of high performance liquid chromatography (HPLC):<br/>1. Determination of sodic Bemiparin by ultraviolet deteccion.<br/>2. Determination of sodic Bemiparin by fluorescence, through of dissaccharide<br/>produced by an enzymatic digestion.