Papel de los antioxidantes en la lesión por isquemia-reperfusión. Estudio experimental de trasplante renal con donante a corazón parado

Abstract

Reproducimos a nivel experimental, utilizando cerdos como animal de experimentación, un trasplante con donante a corazón parado. Se extraen los riñones del donante a corazón parado, se conservan durante 6h-8h en isquemia fría y se practica el implante. El animal se mantiene vivo durante 5 días, al término del cual se procede a la necropsia del animal para analizar el estado del injerto. El animal se mantiene inmunodeprimido durante todo el periodo.<br/>Hemos realizado 40 trasplantes renales divididos en grupos de 10 trasplantes:<br/><br/>Grupo 0: grupo control. Corazón latiente.<br/><br/>Grupo 1: riñones sometidos a 40 minutos de isquemia caliente<br/><br/>Grupo 2: riñones sometidos a 40 minutos de isquemia caliente y recirculación extracorpórea durante 30 minutos.<br/><br/>Grupo 3: riñones sometidos a 90 minutos de isquemia caliente y recirculación extracorpórea durante 30 minutos.<br/><br/>Se han realizado 5 biopsias renales a lo largo del experimento en cada animal determinando el nivel tisular de antioxidantes (superóxido dismutasa, glutation reductasa y glutation peroxidasa)mediante técnica de espectrofotometría Oxis® adaptados al autoanalizador de Cobas Mira (Roche®)y la carga energética, según la fórmula de Atkinson, mediante HPLC.<br/><br/>La viabilidad del injerto se ha determinado por una biopsia renal al 5º día (ausencia de necrosis cortical)<br/><br/>Por primera vez en la literatura médica se realiza un estudio sobre el nivel tisular de antioxidantes en un trasplante renal de forma evolutiva, añadiendo el efecto de la recirculación y con tiempos diferentes de isquemia caliente prolongados.<br/> <br/>Conclusiones:<br/><br/>1-Viabilidad: 100% en el grupo 0 y en el 2, 66% en el grupo 1,60% en el grupo 3<br/><br/>2-Patrón de actuación de los antioxidantes en las diferentes fases del trasplante: la SOD disminuye la concentración en las fases de isquemia caliente y fría y aumenta con la recirculación y con la reperfusión. La glutation reductasa aumenta con la isquemia caliente y reperfusión y disminuye con la recirculación y la isquemia fría. La glutation peroxidasa disminuye con la isquemia caliente y recirculación para aumentar con la isquemia fría y con la reperfusión del injerto.<br/><br/>3-Utilidad de los antioxidantes y de la carga energética en predecir la viabilidad del injerto. La carga energética puede predecir la viabilidad y los tres antioxidantes también dependiendo de los diferentes momentos del experimento y del grupo.<br/><br/>4- Efecto de la recirculación extracorpórea normotérmica durante 30 minutos sobre el nivel de antioxidantes: mejora la concentración de SOD de forma significativa dejando al riñón con mayor concentración de dicha sustancia al momento del implante.<br/><br/>5- Efecto del tiempo de isquemia (40 ó 90 minutos) sobre el nivel tisular de antioxidantes: determinar la glutation reductasa durante la fase de recirculación permite observar mayor concentración de este antioxidante en el grupo de 40 minutos de isquemia caliente y muy baja concentración en el grupo de 90 minutos (p<0,05).