Estudio del efecto de la eritropoyetina sobre la lesión por isquemia-reperfusión en un modelo experimental de enterocolitis necrotizante.

Abstract

INTRODUCCIÓN<br/><br/>La enterocolitis necrotizante (ECN) es una grave enfermedad digestiva que afecta a recién nacidos prematuros y de bajo peso, y que se caracteriza por la aparición de lesiones isquémicas en el intestino delgado y colon que en ocasiones pueden progresar hacia la necrosis transmural y perforación intestinal.<br/><br/>Es una de las urgencias quirúrgicas mas frecuentes durante el periodo neonatal. La Eritropoyetina (Epo) es la principal hormona que induce la formación de los eritrocitos previniendo la muerte por apoptosis de los precursores eritroides y estimulando su proliferación y diferenciación. Además esta hormona estimula la angiogénesis, que es la formación de nuevos vasos a partir de vasos preexistentes. Una de las citoquinas más potentes capaces de inducir la angiogénesis es el factor de crecimiento del endotelio vascular (VEGF). Se ha demostrado en varios estudios la presencia de Epo y su receptor durante el desarrollo fetal en numerosos órganos, incluido el intestino. Además se ha sugerido que podría tener un efecto protector sobre las lesiones intestinales como las de la ECN.<br/><br/>MÉTODOS<br/><br/>La ECN fue inducida en ratas de 15 días de vida recién destetadas mediante oclusión de los vasos mesentéricos superiores durante 45 minutos. Para examinar el efecto protector de la Epo, se administró en dosis de 500U/Kg./día, en sus dos formas, Recombinante humana y Recombinante de rata, durante 6 días previos al clampaje. Tras la isquemia (45 min.) se tomaron muestras del intestino delgado y colon para análisis morfométrico 3 horas después del inicio de la reperfusión.<br/><br/>La lesión mucosa fue valorada microscópicamente de acuerdo con la puntuación de Chiu.<br/><br/>Se realizó estudio inmunohistoquímico para evaluar la expresión de VEGF en la pared del intestino delgado de los diferentes grupos. Para ello empleado un anticuerpo monoclonal y un sistema semicuantitativo para valorar la inmunorreactividad.<br/><br/>Asimismo, se calculó el número medio de vasos que expresaban VEGF en la pared del intestino.<br/><br/>Se determinaron los valores de VEGF en suero mediante la técnica de ELISA.<br/><br/>RESULTADOS<br/><br/>La isquemia causó denudación de las vellosidades y necrosis transmural focal. Las vellosidades se acotaron, el índice de superficie disminuyó y la puntuación de Chiu fue significativamente mayor.<br/><br/>Las dos formas de Epo atenuaron significativamente la lesión intestinal cuando fueron administradas durante los 6 días previos a la isquemia-reperfusión.<br/><br/>El estudio inmunohistoquímico con un anticuerpo monoclonal frente al VEGF mostró una intensidad de la tinción en las células epiteliales de las vellosidades significativamente superior en los dos grupos en los que se administró Epo en comparación con el grupo ECN.<br/><br/>El número medio de vasos identificados que expresaban VEGF fue también significativamente superior en los dos grupos de profilaxis con Epo.<br/><br/>La determinación de VEGF en el suero de los animales demostró que la concentración de ésta citoquina angiogénica fue mas elevada en el suero de ratas tratadas con Epo recombinante humana.<br/><br/>CONCLUSIONES<br/><br/>El modelo de isquemia-reperfusión intestinal en la rata de 15 días de vida consigue unas lesiones morfológicamente similares a las de la enterocolitis necrotizante en el recién nacido humano.<br/><br/>La administración profiláctica de eritropoyetina tiene un efecto protector sobre las lesiones intestinales secundarias a la isquemia-reperfusión observadas en este modelo.<br/><br/>El efecto de la eritropoyetina recombinante humana está mediado, al menos en parte, por un aumento en la expresión, local y sistémica, de la citoquina angiogénica VEGF.