Desenvolupament, caracterització i avaluació in vitro-ex vivo de noves formulacions tòpiques pel tractament de la leishmaniosi cutània

dc.contributor
Universitat de Barcelona. Departament de Farmàcia i Tecnologia Farmacèutica
dc.contributor.author
Pujol Brugués, Alba
dc.date.accessioned
2015-02-24T11:45:56Z
dc.date.available
2015-02-24T11:45:56Z
dc.date.issued
2015-01-23
dc.identifier.uri
http://hdl.handle.net/10803/285971
dc.description.abstract
La leishmaniosi constitueix un conjunt de malalties causades per diferents espècies del gènere Leishmania que presenten diferents formes clíniques depenent de l’espècie, del seu tropisme i de la resposta immune de l’hoste. Les manifestacions clíniques inclouen lesions cutànies (leishmaniosi cutània), mucocutànies (leishmaniosi mucocutània) i viscerals (leishmaniosi visceral o Kala-azar). Els fàrmacs actualment disponibles per al tractament de la leishmaniosi en general inclou antimonials pentavalents, amfotericina B, miltefosina i paromomicina entre altres, molts d'ells amb grans limitacions relatives a la seva toxicitat, elevat cost i administració. Degut a la necessitat existent de nous compostos anti-Leishmania més segurs, més barats i més fàcils d’administrar que els medicaments actuals, l’objectiu d’aquesta tesi ha sigut desenvolupar, caracteritzar i avaluar una nova nanoformulació d’administració tòpica pel tractament de la leishmaniosi cutània. S’ha elaborat una formulació en forma de nanogel a base de poloxamer 407 incloent paromomicina com a fàrmac anti-Leishmania per l’aplicació tòpica en el tractament de la leishmaniosi cutània. S’ha optimitzat i avaluat aquest nou vehicle d'aplicació tòpica, fent assajos d'alliberament in vitro així com assaigs de permeació ex vivo. Una condició bàsica i fonamental per a la consecució d'aquests assaigs és disposar d'un mètode apropiat de quantificació del fàrmac. Per això, un segon objectiu ha sigut desenvolupar i validar segons la normativa ICH en termes de linealitat, precisió, exactitud, robustesa i sensibilitat un mètode analític basat en una cromatografia líquida de fase inversa. Per a realitzar l’avaluació dels diferents paràmetres de caracterització de la formulació de nanogel, s’han dut a terme estudis d’alliberació del fàrmac del vehicle mitjançant membranes artificials en cel·les de Franz i estudis de permeaciò en pell humana. Els estudis de citotoxicitat s’han efectuat en diferents línies cel·lulars tumorals i l’efectivitat antileishmanicida s’ha realitzat enfront a dues espècies diferents de Leishmana. Per últim, s’han iniciat estudis de microscòpia confocal de fluorescència amb l’objectiu d’estudiar la localització subcel·lular de nanopartícules (liposomes) mitjançant la utilització de quantum dots englobats dins de liposomes i utilitzant diferents marcadors cel·lulars.
cat
dc.description.abstract
Leishmaniasis is a group of diseases caused by protozoan parasites of the genus Leishmania. There are different clinical forms depending on the species of Leishmania, its tropism and the host immune response. Clinical manifestations include skin lesions (cutaneous leishmaniasis), mucocutaneous (mucocutaneous leishmaniasis) and visceral (Kala-azar or visceral leishmaniasis). The drugs currently available for the treatment of leishmaniasis usually include pentavalents antimonials, amphotericin B, miltefosine, Paromomycin and others, many of them with great limitations concerning their toxicity, high cost and complicated administration. Due to the existing need of new compounds anti-Leishmania safer, cheaper and easier administration than the current drugs, the aim of this thesis was to develop, characterize and evaluate a new nano-formulation for topical administration treatment of cutaneous leishmaniasis. We developed a new paromomycin micellar nanogel based on poloxamer 407 as an anti-Leishmania topical application drug for the treatment of cutaneous leishmaniasis. We optimized and evaluated this new vehicle for topical application, making in vitro release and ex vivo permeation studies. Previously, we developed an appropriate method to quantify the drug. Therefore, another objective was to validate according to ICH regulations in terms of linearity, precision, accuracy, robustness and sensitivity of an analytical method based on a reverse phase liquid chromatography. To perform the evaluation of the nanogel’s formulation we conducted studies of drug release from the vehicle using vertical diffusion Franz cells with artificial membranes and the permeation studies in human skin with same method. Cytotoxicity studies were carried out in different tumor cell lines by the cell proliferation reagent WST-1 and anti-Leishmania activity were made against two different species of Leishmania. Finally, confocal microscopy studies were initiated in order to study the subcellular nanoparticles (liposomes) localization using quantum dots included within liposomes and using different stein cells.
eng
dc.format.extent
212 p.
cat
dc.format.mimetype
application/pdf
dc.language.iso
cat
cat
dc.publisher
Universitat de Barcelona
dc.rights.license
ADVERTIMENT. L'accés als continguts d'aquesta tesi doctoral i la seva utilització ha de respectar els drets de la persona autora. Pot ser utilitzada per a consulta o estudi personal, així com en activitats o materials d'investigació i docència en els termes establerts a l'art. 32 del Text Refós de la Llei de Propietat Intel·lectual (RDL 1/1996). Per altres utilitzacions es requereix l'autorització prèvia i expressa de la persona autora. En qualsevol cas, en la utilització dels seus continguts caldrà indicar de forma clara el nom i cognoms de la persona autora i el títol de la tesi doctoral. No s'autoritza la seva reproducció o altres formes d'explotació efectuades amb finalitats de lucre ni la seva comunicació pública des d'un lloc aliè al servei TDX. Tampoc s'autoritza la presentació del seu contingut en una finestra o marc aliè a TDX (framing). Aquesta reserva de drets afecta tant als continguts de la tesi com als seus resums i índexs.
dc.source
TDX (Tesis Doctorals en Xarxa)
dc.subject
Leishmània
cat
dc.subject
Leishmania
cat
dc.subject
Materials nanoestructurats
cat
dc.subject
Materiales nanoestructurados
cat
dc.subject
Nanostructured materials
cat
dc.subject
Liposomes
cat
dc.subject
Liposomas
cat
dc.subject
Antibiòtics
cat
dc.subject
Antibióticos
cat
dc.subject
Antibiotics
cat
dc.subject
Paromomicina
cat
dc.subject
Paromomycin
cat
dc.subject.other
Ciències de la Salut
cat
dc.title
Desenvolupament, caracterització i avaluació in vitro-ex vivo de noves formulacions tòpiques pel tractament de la leishmaniosi cutània
cat
dc.type
info:eu-repo/semantics/doctoralThesis
dc.type
info:eu-repo/semantics/publishedVersion
dc.subject.udc
615
cat
dc.contributor.director
Riera Lizandra, Ma. Cristina
dc.contributor.director
Calpena Campmany, Ana Cristina
dc.contributor.director
Clares Naveros, Beatriz
dc.contributor.tutor
Badia Palacín, Josefa
dc.embargo.terms
cap
cat
dc.rights.accessLevel
info:eu-repo/semantics/openAccess
dc.identifier.dl
B 6855-2015
cat


Documentos

APB_TESI.pdf

8.560Mb PDF