Determinación bioanalítica de compuestos de relevancia clínica mediante cromatografía líquida micelar

Abstract

La tesis consistió en el desarrollo, optimización y validación de dos métodos para la determinación de, por un lado, algunos inhibidores de tirosina quinasa (TKIs) (imatinib, lapatinib, erlotinib, sorafenib y sunitinib) en plasma y, por otro, las catecolaminas en orina, basándose en la cromatografía líquida micelar (MLC). Ambos métodos usaron una columna apolar C18 como fase estacionaria, y disoluciones del tensioactivo dodecil sulfato sódico por encima de su concentración micelar crítica, tamponadas con fosfato y circulando isocráticamente, como fase móvil. La detección fue por absorción UV-Visible para TKIs, mientras que electroquímica para catecolaminas. Las TKIs se determinan para personalizar y monitorizar el tratamiento anticancerígeno, mientras que las catecolaminas se determinan para el diagnóstico de ciertas patologías relacionadas con su aumento. Los métodos se validaron según la guía de validación para análisis de fármacos en muestras biológicas de la Agencia Europea del Medicamento, y se probaron en muestras biológicas reales.

The thesis consisted of the development, optimization and validation of two methods for determination of, on one hand, some tyrosine kinase inhibitors (TKIs) (imatinib, lapatinib, erlotinib, sorafenib and sunitinib) in plasma and, on the other hand, catecholamines in urine, based on micellar liquid chromatography (MLC). Both methods used a C18 apolar column as the stationary phase, and solutions of sodium dodecyl sulphate surfactant above its critical micelle concentration, phosfate buffered and isocratically circulating as the mobile phase. TKIs detection was by UV-Visible absorption, while catecholamines´ was electrochemical. Cathecolamines are determined for the diagnosis of certain pathologies related to their increase, meanwhile TKIs are measured to personalize and monitorize anticancer treatment. The methods were validated according to the validation guide for drug analysis in biological samples from the European Medicine Agency, and they were tested on real biological samples.