Papel del factor de transcripción SOX11 en la caracterización del linfoma de células del manto

Abstract

El Linfoma de células del Manto (LCM) es un linfoma B maduro, con una característica sobreexpresión de la proteína nuclear Ciclina D1. Se caracteriza por presentar un curso clínico agresivo, aunque se ha observado que algunos pacientes tienen un curso clínico más indolente. Recientemente se ha observado que el factor de transcripción SOX11 tiene una sobreexpresión específica en este tipo de linfoma.

El diagnóstico diferencial entre el LCM y otros tipos de linfoma B puede ser difícil. Un problema es el diagnostico diferencial entre el Linfoma Difuso de Célula B Grande (LDCBG) Ciclina D1 positivo y las variedades pleomórfica y blastoide del LCM. Dado que los pacientes se tratan de forma diferente es importante identificar parámetros que permitan establecer el diagnostico diferencial.

Estudios recientes han identificado algunos LCM que de forma peculiar presentan una diferenciación plasmocelular. Recientes trabajos han implicado SOX11 en el bloqueo de la diferenciación B terminal a través de la expresión forzada de PAX5. Así pues estas observaciones permiten postular que la diferenciación plasmocelular y más ampliamente el inicio de la diferenciación B-terminal en LCM se debe producir preferentemente en LCM SOX11 negativos.

En esta Tesis doctoral hemos estudiado el papel del factor de transcripción SOX11 en el LCM. La intención era poder encontrar herramientas prácticas que nos ayuden a poder identificar y caracterizar mejor al LCM. En este sentido hemos estudiado el valor de SOX11 y otros parámetros en el diagnostico diferencial entre el LCM y el LDCBG Ciclina D1 positivo y por otra parte hemos analizado la diferenciación B-terminal en LCM y su relación con la expresión de SOX11.

En el primer manuscrito de esta Tesis hemos teñido 206 LDCBG para Ciclina D1 e identificamos tres casos (1.5%) positivos. Los tres casos eran SOX11 negativos y por FISH se confirmó la ausencia de aberraciones de CCND1. Se estudiaron 22 LCM, todos expresando Ciclina D1 con 89% de los casos expresando SOX11, una frecuencia estadísticamente

significativa en relación al LDCBG Ciclina D1 positivo. Una cohorte separada de 98 LDCBG resulto negativa para SOX11, con solo un caso Ciclina D1 positivo. Este LDCBG Ciclina D1 positivo tampoco presento aberraciones de CCND1 por estudios de FISH.

En el segundo manuscrito de esta Tesis hemos investigado el fenotipo de diferenciación terminal de células B en 60 LCM 41 SOX11-positivos y 19 SOX11-negativos. Se observaron células plasmáticas monotípicas y células linfoides con diferenciación plasmocítica expresando Ciclina D1 en 7 (37%) casos SOX11-negativos, pero en ninguno de los 41 casos SOX11-positivos (p<0.001). Los tumores SOX11-negativos tenían más frecuentemente una expresión intensa citoplasmática con restricción de una cadena ligera de inmunoglobulina que los positivos (58% vs 13%) (p=0.001). Similarmente los casos SOX11-negativos tenían una expresión de BLIMP1 y XBP1 significativamente más frecuente que en los casos positivos (83% vs 34% y 75% vs 11%, respectivamente) (p=0.001). Sin embargo, no se observaron diferencias en la expresión de IRF4/MUM1 entre estos subtipos de LCM.

En resumen, las conclusiones principales de esta Tesis son que el LDCBG Ciclina D1 positivo es poco frecuente, es negativo para SOX11 o aberraciones de CCND1. Por tanto SOX11 es útil en el diagnostico diferencial entre LDCBG Ciclina D1 positivo y LCM. Además el LCM SOX11-negativo puede ser un subtipo específico de este tumor que se caracteriza por presentar con mayor frecuencia características morfológicas e inmunofenotípicas de diferenciación terminal de células B, que pueden ser facilitadas por la ausencia del factor de transcripción SOX11.

Mantle cell lymphoma (MCL) is characterized by a proliferation of malignant B lymphocytes, presenting an aggressive clinical course, although some patients have a more indolent presentation. The genetic hallmark of this lymphoma is the t(11;14)(q13;q32) leading to the overexpression of Cyclin D1. SOX11 is new and specific diagnostic marker for MCL.

Cyclin D1 overexpression can also be seen in other hematological malignancies such as Diffuse Large B Cell Lymphoma (DLBCL). These cases may pose diagnostic challenges and are difficult to differentiate from MCL. In the first study of this Thesis we stained 206 DLBCLs for Cyclin D1 and identified 1.5% positive cases. These DLBCLs showed SOX11 negativity and absence of CCND1 aberrations. Also 22 MCLs were studied, with 89% cases expressing SOX11. A separate cohort of 98 DLBCLs was negative for SOX11, with only one case expressing Cyclin D1.

Experimental studies have shown that silencing of SOX11 in MCL cells promotes the shift from a mature B cell into an early plasmacytic differentiation phenotype suggesting that SOX11 may contribute to tumor development by blocking the B-cell differentiation program. In the second study of this Thesis we have investigated the terminal B-cell differentiation phenotype in 60 mantle cell lymphomas. Monotypic plasma cells and lymphoid cells with plasmacytic differentiation expressing Cyclin D1 were observed in 37% SOX11-negative cases but in none of the SOX11-positive MCLs (p<0.001). BLIMP1 and XBP1 expression was also significantly more frequent in SOX11-negative than positive cases (83% vs 34% and 75% vs 11%, respectively) (p=0.001). These results indicate that SOX11-negative MCL may be a particular subtype characterized by more frequent morphological and immunophenotypic terminal B-cell differentiation features that may be facilitated by the absence of this transcription factor.

In summary, the main conclusions of this Thesis are that Cyclin D1-positive DLBCLs are rare and negative for SOX11 or CCND1 aberrations. There fourth SOX11 is useful in differentiating Cyclin D1-positive DLBCL from MCL. We also demonstrated that SOX11-negative MCL is a particular subtype of this tumor characterized by more frequent morphological and immunophenotypic terminal B-cell differentiation features.