Utilidad de los teratocarcinomas para el estudio de los linajes embrionarios

Abstract

Esta tesis doctoral se integra en una línea de investigación centrada en el estudio del crecimiento y de la diferenciación celulares analizados mediante el modelo de los cuerpos embrioides cavitados (BC1) y simples (BS1) derivados del teratocarcinoma murino OTT6050. El objetivo de la tesis es comprobar las determinaciones de las células de carcinoma embrionario mediante un estudio comparativo inmunológico entre unos cuerpos embrioides y otros.

Los cuerpos embrioides se separan mediante una centrifugación en un gradiente de Ficoll 400, se usan como inmunógeno y se administran, con y sin adyuvante de Freund, mediante dos pautas distintas a conejos diferentes. Acabada la inmunización se extrae la sangre y se descomplementa. Los antisueros se analizan mediante las técnicas de Elisa, “inmunoblotting” e inmunohistoquímica.

La técnica de Elisa demuestra que el suero anti-BC1 deja de presentar actividad a la dilución 1/9600 y el suero anti-BS1 presenta actividad a la dilución 1/51200. El suero anti-BC1 identifica una proteína de 90000 daltons en los tejidos adultos murinos probados, mientras que al antisuero anti-BS1 presenta afinidad por una amplia gama de proteínas de diversos pesos moleculares en los tejidos analizados. El suero anti-BC1 marca el ectodermo extraembrionario y el endodermo visceral de embriones murinos de 6 y de 7 días; el antisuero anti-BS1 reacciona con derivados de las tres hojas embrionarias.

Los resultados indican que las células de los cuerpos embroides BC1 son más pluripotentes que las células de los cuerpos embroides BS1. El modelo estudiado permitiría en estudios futuros la obtención de anticuerpos monoclonales de gran utilidad tanto para la obtención de marcadores embrionarios como tumorales.