Validación de la sobreexpresión de la proteína p16 mediante inmunohistoquímica en el diagnóstico histológico de neoplasia intraepitelial de cérvix grado 2 y en la predicción de su capacidad evolutiva

Abstract

Introducción A principios de los años 70 quedó claramente establecido que el Virus del Papiloma Humano (VPH) es el agente causal del cáncer de cérvix. Además, su historia natural, de una decena de años, desde la infección hasta la aparición del cáncer, está muy bien estudiada. Estas características, hacen que el cáncer de cérvix sea una enfermedad idónea para establecer programas de prevención, tanto primaria como secundaria. Las lesiones preneoplásicas de cérvix, suponen un número muy elevado de consultas y reconsultas, generando ansiedad a las pacientes, generalmente jóvenes, que en ocasiones, deben ser sometidas a intervenciones quirúrgicas. Esto supone un elevado coste para la sanidad pública, por tanto debemos tratar de ser los más eficientes, seleccionando bien a las pacientes a seguir y tratar.

Objetivos del estudio Valorar la idoneidad del uso de la clasificación en tres grados 1 – 2 y 3 de las neoplasias intrepiteliales de cérvix (CIN) estudiando la concordancia entre patólogos a la hora de establecer diagnósticos. Estudiar como modifica la concordancia entre ellos la tinción de Inmunohistoquímica p16 y valorar la idoneidad del uso de la clasificación binaria – lesiones de alto o bajo grado – para el diagnóstico de estas mismas lesiones. Estudiaremos también si p16 puede predecir qué lesiones evolucionaran peor.

Material y método Hemos recogido de nuestro archivo 132 biopsias de cérvix diagnosticadas entre 1999 y 2007 de CIN 2, y las hemos mezclado con una muestra aleatoria de 154 biopsias de cérvix más, con diagnóstico de Negativo, CIN 1, CIN 2, CIN 3 o carcinoma. Las hemos hecho reevaluar por tres patólogos diferentes, estableciendo índices de concordancia. Posteriormente hemos realizado p16 a una representación de las biopsias para volver a establecer datos de concordancia. Después, pasamos una selección aleatoria de 50 biopsias teñidas sólo con HE para establecer el diagnóstico en base a la clasificación binaria. También hemos estudiado la relación entre el resultado de p16 de las biopsias de CIN 2 y el resultado de la conización posterior.

Resultados y Discusión El índice de concordancia (índice Kappa) entre los diferentes patólogos a la hora de establecer un diagnóstico sobre la biopsia pequeña de cérvix con HE se sitúa alrededor de 0,40, siendo más bajo para las lesiones CIN 1 y CIN 2 que para los diagnósticos CIN3. Con el uso indiscriminado de p16 no sólo no mejora, si no que empeora, en cambio sí observamos una notable mejoría del índice Kappa utilizando la clasificación binaria (llega a alcanzar un valor de 0,75) que mejora utilizando p16 conjuntamente (hasta 0,82). En la mayor parte de los casos las biopsias CIN 2 que fueron positivas para p16 presentan una pieza de conización con una lesión de alto grado (CIN2+) pero no en el 100% de los casos, y también encontramos casos con p16 negativa que van seguidas de una lesión de alto grado.

Conclusiones La clasificación binaria de las lesiones preneoplásicas de cérvix, mejora la concordancia interobservador a la hora de establecer diagnósticos. P16 ayuda, si se utiliza después de una formación, y se reserva para aquellos casos dudosos. No se pueden establecer diagnósticos basados sólo en el resultado de p16, es un complemento a la hematoxilina.

Introduction In the early 70's it was clearly established that the Human Papillomavirus (HPV) is the causative agent of cervical cancer. In addition, its natural history, of about ten years, from infection to the appearance of cancer, is very well studied. These characteristics make cervical cancer an ideal disease to establish prevention programs, both primary and secondary. The preneoplastic lesions of the cervix, suppose a very high number of consultations and reconsultations, generating anxiety to the patients, generally young, that sometimes, must be submitted to surgical interventions. This supposes a high cost for the public health, therefore we must try to be the most efficient, selecting the patients well to follow and treat.

Objectives of the study To assess the suitability of the use of the classification in three grades 1 - 2 and 3 of the intraepithelial neoplasms of the cervix (CIN), studying the agreement between pathologists when establishing diagnoses. To study how the agreement between them corrects the p16 Immunohistochemical staining and to evaluate the suitability of the use of the binary classification - high or low grade lesions - for the diagnosis of these same lesions. We will also study if p16 can predict which lesions will evolve worse.

Material and method We have collected from our archive 132 cervical biopsies diagnosed between 1999 and 2007 of CIN 2, and we have mixed them with a random sample of 154 more cervical biopsies, with a diagnosis of Negative, CIN 1, CIN 2, CIN 3 or carcinoma. We have reevaluated them by three different pathologists, establishing concordance rates. Subsequently we performed p16 to a representation of the biopsies to re-establish concordance data. Then, we passed a random selection of 50 biopsies stained with HE only to establish the diagnosis based on the binary classification. We have also studied the relationship between the p16 result of the CIN 2 biopsies and the result of the subsequent conization.

Results and Discussion The concordance index (Kappa index) between the different pathologists when establishing a diagnosis of small biopsies of the cervix with HE is around 0.40, being lower for the CIN 1 and CIN 2 lesions than for the diagnoses CIN3. With the indiscriminate use of p16 not only does it not improve, but it does get worse, however we do observe a notable improvement in the Kappa index using the binary classification (it reaches a value of 0.75) that improves using p16 together (up to 0, 82). In most cases the CIN 2 biopsies that were positive for p16 present a conization piece with a high-grade lesion (CIN2 +) but not in 100% of the cases, and we also found cases with negative p16 that are followed of a high-grade injury.

Conclusions The binary classification of preneoplastic lesions of the cervix improves the interobserver concordance when establishing diagnoses. P16 helps, if used after a training, and is reserved for those doubtful cases. You can not establish diagnoses based only on the result of p16, it is a complement to hematoxylin.