Capacidad pronóstica de la expresión de la mieloperoxidasa en los pacientes con carcinomas escamosos de cabeza y cuello

Abstract

Los neutrófilos asociados a tumores (TAN) representan una parte significativa del infiltrado celular inflamatorio en el carcinoma de cabeza y cuello (CECC). Varios estudios han demostrado una asociación significativa entre TAN y el mal resultado clínico en pacientes con CECC. La mieloperoxidasa (MPO) es una enzima peroxidasa expresada en TAN. La expresión de MPO podría ser un biomarcador para la identificación y cuantificación de TAN. El objetivo de nuestro estudio fue evaluar la expresión transcripcional de la MPO en tumores CECC, y evaluar la relación entre la expresión de la MPO y la aparición de metástasis a distancia. Se utilizó RT-PCR para determinar los niveles de expresión de ARNm de MPO en 160 pacientes consecutivos con CECC tratados entre 2004 y 2010. Se analizaron los valores continuos de expresión de ARNm utilizando un método de árbol de clasificación y regresión (CART) considerando la aparición de metástasis a distancia como la variable dependiente. Durante el período de seguimiento, 22 pacientes (13,7%) presentaron metástasis a distancia. El nivel de expresión de ARNm de MPO en pacientes con metástasis a distancia fue significativamente mayor que en pacientes sin (p = 0,001). El método CART clasificó a los pacientes en dos categorías: alto (n = 60, 37.5%) o bajo (n = 100, 62.5%) nivel de expresión de MPO. La supervivencia libre de metástasis a distancia a los 5 años fue del 65,2% para los pacientes con alta expresión de MPO y del 95,7% para los pacientes con baja expresión de MPO (p < 0,001). Considerando los pacientes con una baja expresión de MPO como grupo de referencia, los pacientes con una alta expresión de MPO tuvieron un riesgo 7.7 veces mayor de aparición de metástasis a distancia (IC del 95%: 2.55-23.24). Los pacientes con alto riesgo de metástasis a distancia basado en variables clínicas y patológicas, como los tumores localmente avanzados (cT3-T4), estadiaje regional avanzado (cN2-N3), o ruptura extracapsular, y que tuvieron una alta expresión de MPO (n = 42), presentaron una supervivencia libre de metástasis a distancia a los 5 años de 57.4%. Los pacientes con ganglios linfáticos con ruptura capsular prerentaron una tendencia a tener niveles más altos de expresión transcripcional de MPO. La expresión elevada de ARNm MPO en el tumor se asoció con la expresión de genes implicados en el proceso de diseminación (prostaglandina sintetasa, tromboxano, CD45, RANTES, metaloproteinasas, superóxido dismutasas....). Los tumores de pacientes que contaron con la aparición de metástasis a distancia presentaron un nivel de MPO por inmunohistoquímica significativamente mayor al de pacientes que no sufrieron la aparición de metástasis a distancia apareados en función de la localización tumoral y la extensión loco-regional. No se relacionó la concentración de MPO en secretoma ni en suero con la aparición de metástasis a distancia. Los medios condicionantes de los PMN activados no favorecieron la migración celular. La principal conclusión de esta tesis es que encontramos una relación significativa entre el nivel de expresión de MPO de ARNm y la aparición de metástasis a distancia en pacientes con CECC. La combinación de datos clínico-patológicos con la expresión de MPO puede ser utilizada para identificar pacientes de CECC con alto riesgo de metástasis a distancia.

Tumor-associate neutrophils (TAN) represent a significant portion of the inflammatory cell infiltrate in head and neck carcinoma (HNSCC). Several studies have shown a significant association between TAN and poor clinical outcome in HNSCC patients. Myeloperoxidase (MPO) is a peroxidase enzyme expressed in TAN. MPO expression could be a biomarker for the identification and quantification of TAN. The objective of our study was to evaluate the transcriptional expression of MPO in HNSCC tumors, and to evaluate the relationship between MPO expression and the appearance of distant metastasis. We used RT-PCR to determine mRNA expression levels of MPO in 160 consecutive patients with HNSCC treated between 2004-2010. Continuous values of mRNA expression were analyzed using a classification and regression tree (CART) method considering the appearance of distant metastases as the dependent variable. During the follow-up period, 22 patients (13.7%) presented with distant metastases. mRNA expression level of MPO for patients with distant metastases was significantly higher than for patients without (P = 0.001). The CART method classified patients in two categories: high (n = 60, 37.5%) or low (n = 100, 62.5%) expression level of MPO. The 5-year distant metastasis free survival was 65.2% for MPO high-expression level and 95.7% for MPO low-expression level (P < 0.001) patients. Considering patients with a low MPO expression as the reference group, patients with a high MPO expression had a 7.7 fold higher risk of appearance of distant metastases (CI 95%: 2.55-23.24). Patients with high risk of distant based on clinical and pathological variables, including patients with locally advanced tumors (cT3-T4), with advanced regional lymph nodes (cN2-N3), or with neck node metastases with extracapsular spread, who had a high MPO expression (n = 42) had a 5-year distant metastasis free survival of 57.4%. Patients with lymph nodes with extracapsular rupture tended to have higher levels of transcriptional expression of MPO. Elevated expression of mRNA MPO in the tumor was associated with expression of genes involved in the dissemination process (prostaglandin synthetase, thromboxane, CD45, RANTES, metalloproteinases, superoxide dismutases...). The tumors of patients who presented distant metastases had a significantly higher level of MPO by immunohistochemistry than patients who did not suffer the appearance of distant metastases. The concentration of MPO in secretoma or serum was not related to the appearance of distant metastasis. The conditioning agents of the activated PMN did not promote the cell migration. The main conclusion of this thesis is that we found a significant relationship between mRNA MPO expression level and the appearance of distant metastases in HNSCC patients. The combination of clinical-pathological data with the MPO expression can be used to identify patients with a high risk of distant metastases.