Reproducción y diferenciación estructural del hepatocito de pollo durante el desarrollo embrionario

Abstract

Quisiéramos esbozar en estas líneas el trasfondo teórico de nuestro proyecto doctoral, señalando los propósitos que lo animaron y el plan concreto que nos propusimos.

Durante nuestros años de estudiante de Medicina tuvimos la oportunidad de trabajar en el laboratorio de Histología y Anatomía Patològica, donde nos familiarizamos con los principales métodos y objetivos de la morfología. Desde entonces dos problemas centraron nuestra atención: el de la reproducción celular (cosa nada excepcional si se tiene en cuenta que una de las principales tareas del laboratorio era el diagnóstico histológico de tumores) y el de, permitásenos llamarle así, “matemática de la morfología”.

Nos preguntábamos si podría intentarse una explicación racional de las estructuras a través de una mecánica del desarrollo. Parecía que la unica vía de acceso racional a las estructuras biológicas pasaba a través de su descripción molecular y una vez tendido el puente al campo de la química, las propiedades de la estructura podrían deducirse a partir de las propiedades moleculares. ¿Significaba esto que no valía la pena intentar ningún análisis cuantitativo de los desarrollos hasta que su descripción en términos moleculares fuera completa? No fue esta nuestra opinión, creímos que de algunos aspectos se conocía lo· suficiente para poderlos estudiar cuantitativamente y que una mecánica del desarrollo era factible hasta cierto punto.

Los desarrollos embrionarios pueden descomponerse analíticamente en fenómenos tales como crecimiet1to, diferenciación y movimientos morfogenéticos. Por su misma naturaleza, el primero de ellos es más fácil de medir y, por tanto, su estudio era algo que convenía a nuestra posición en relación a la morfología. De esta manera se originó nuestro proyecto doctoral: Analizaríamos el crecimiento de un órgano embrionario utilizando en la medida de lo posible la nueva metodología y las nuevas concepciones sobre reproducción cellular y cinética de poblaciones.

Elegimos el parénquima hepático por las interesantes posibilidades experimentales que ofrecía para una línea de investigación coherente sobre ciclo celular, ya que se trataba de una de las celulas metabólicamente mejor conocidas, entre las de los organismos pluricelulares. Puesto que el hepatocito del animal adulto raramente se reproduce, adoptamos para el estudio la célula del hepatocito del embrión, que no tiene esta limitación y nos iba a permitir obtener mayor información sobre la regulación del ciclo celular.

El trabajo doctoral quedó estructurado en tres partes. En la primera, realizamos un estudio del crecimiento global del hígado al modo clásico, pero usando como parámetro de crecimiento la cantidad de DNA/órgano en lugar del peso/órgano. También se incluía un estudio comparativo entre el crecimiento del hígado y otros dos órganos (corazón y encéfalo, siempre usando el mismo parámetro de crecimiento. El objetivo de dicho estudio era establecer si los tres órganos mantenían durante su crecimiento embrionario una relación alométrica de Huxley, que implicaba una variación proporcional de las velocidades específicas de crecimiento.

En la segunda parte, realizaríamos un estudio directo de la reproducción del hepatocito mediante la técnica del bloqueo y acumulación de mitosis con Colchicina o Vinblastina, de manera que podríamos conocer el conocer la duración media del ciclo celular de los hepatocitos a distintos tiempos del desarrollo embrionario, también conocido como tiempo de generacion promedio (GT). Otro objetivo de esta parte sería estudiar la estruc·tura cinética interna del ciclo de reproducción, mediante la medición de un nuevo para.metro ideado por nosotros y que denominamos "Coincidencia Mitótica" (Mco).

Por ultimo, en la tercera parte haríamos un estudio estructural del hepatocito embrionario mediante microscopia electrónica, aplicando metodos estereológicos que nos permitirían una cuantificación parcial de la estructura. Los datos obtenidos podrían ser comparados con los datos cinéticos y podría intentarse el establecimiento de correlaciones entre estructura y reproducción celulares.