Implicació de la calmodulina en la progressió a través de la fase G1 del cicle cel·lular

Author

Taulés i Marín, Marta

Director

Agell i Jané, Neus

Date of defense

1999-06-24

Pages

173 p.



Department/Institute

Universitat de Barcelona. Departament de Biologia Cel·lular i Anatomia Patològica

Abstract

Se ha estudiado el papel de la calmodulina (CaM) sobre la regulación de la actividad de la cdk4, cdk2, expresión y localización intracelular de las proteínas que intervienen en la progresión a través de la etapa H1 del ciclo celular. La adición de drogas anti-CaM a un cultivo de células NRK ("normal rat kidney") durante el principio del G1 provoca la inhibición de la actividad cdk4 y cdk2 y también se encuentra la proteína del retinoblastoma hipofosforilada. Los niveles totales de cdk4, ciclina D1, ciclina D2, cicE, p21 y p27 no están afectados por el tratamiento, pero sí que se observó una disminución en la cantidad de cicA y cdc2. La disminución en la actividad de la cdk4 no se debe a un cambio en las proteínas que se le asocian, ni a un cambio en la cantidad de proteínas inhibidoras unidas al complejo ckd4/cicD1. La inhibición de la CaM provoca una translocación del núcleo al citoplasma para la cdk4/cicD1, evitando de este modo que pRb se fosforile bajo el efecto de la droga anti-CaM. Mediante técnicas de inmunoprecipitación, columnas de afinidad y "pull down" se ha demostrado que la cdk4 y la cicD1 se asocian tanto in vivo como in vitro a través de una proteína aceptora de CaM. Como la Hsp90 interactúa con la cdk4 in vivo, y que dicha interacción puede facilitar la translocación de la cdk4 y la cicD1 al núcleo, la Hsp90 es una buena candidata para desempeñar el papel de CaMBP en la transcolocación de la cdk4/ckcD1 al núcleo. Por otro lado se encontró que la p21 coinmunoprecipitaba con la CaM y también en sentido contrario, esta interacción se comprobó que era directa utilizando "pull down". Además se comprobó que la CaM era esencial para acumulación de la p21 en el núcleo.

Keywords

Calmodulina; Calmodulin; Proteïnes portadores; Proteínas transportadoras; Carrier proteins; Calci en l'organisme; Calcio en el organismo; Calcium in the body; Cicle cel·lular; Ciclo celular; Cell cycle

Subjects

577 - Material bases of life. Biochemistry. Molecular biology. Biophysics

Knowledge Area

Ciències de la Salut

Note

Versió digital de l'exemplar físic dipositat a la Biblioteca de la Facultat de Medicina - Campus Clínic

Documents

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