Aplicación de la proteómica en el estudio de factores pronósticos de la nefropatia IgA

Abstract

La nefropatía IgA (NIgA) es la glomerulonefritis más común en nuestro medio, caracterizada por una amplia variabilidad clínica, que va desde un curso benigno hasta la insuficiencia renal rápidamente progresiva. Su diagnóstico se realiza a través de biopsia renal, siendo un procedimiento invasivo y no excento de complicaciones. Además, se sabe que el 40% de los pacientes diagnosticados de NIgA evolucionarán a enfermedad renal crónica terminal en un período de 20 años. Se han descrito factores clásicos de mal pronóstico, inespecíficos y que comparten con otras enfermedades renales. Por este motivo, es necesaria la búsqueda de nuevos biomarcadores que sirvan de ayuda al nefrólogo en la identificación de esta enfermedad y de los grupos de mayor riesgo de evolución, en los que un tratamiento temprano y dirigido sería de gran utilidad. La proteómica representa una herramienta accesible y reproducible que permite la identificación en sangre y orina, de péptidos relacionados a procesos biológicos. En los estudios que conforman esta tesis doctoral, se han aplicado técnicas proteómicas mediante la espectrometría de masas para identificar un perfil de péptidos en sangre, plasma y orina, asociado a parámetros clínicos, bioquímicos e histológicos en una cohorte de pacientes con NIgA primaria y con depósitos de C4d. Como resultados, identificamos los péptidos C4a, bradicinina, α-1- antitripsina (A1AT), B2 microglobulina y uromodulina (UMOD) que diferenciaban correctamente a los pacientes con NIgA de su grupo control y que se asociaban con los parámetros de peor evolución renal como proteinuria, niveles de creatinina, doble de la creatinina, glomeruloesclerosis y afectación tubulointersticial. Además, en la NIgA con depósitos de C4d, los péptidos A1AT y C4a, se asociaban con este grupo y lo diferenciaban de su grupo control, C4d negativo. A través de curvas ROC se establecieron puntos de corte de estos péptidos que discriminaban correctamente entre grupos. También los pacientes con NIgA y depósitos de C4d mostraban niveles más elevados de proteinuria y lesiones de glomeruloesclerosis e hipercelularidad endocapilar más graves que los pacientes C4d negativos, confirmando su peor pronóstico renal. Nosotros proponemos el uso de técnicas proteómicas como herramienta en la búsqueda de marcadores de mal pronóstico renal en la NIgA, para establecer un diagnóstico precoz e identificar pacientes de mayor riesgo de evolución renal, tributarios de terapias más agresivas.

IgA nephropathy (IgAN) is the most common primary glomerulonephritis worldwide, characterized by wide clinical variability, ranging from a benign to rapidly progressive renal failure. The diagnosis of IgAN is made by renal biopsy, being an invasive procedure with potential complications. Moreover, the majority of patients with IgAN have a progressive disease, with 40% of cases reaching end stage renal disease within 20 years after diagnosis. It has been described poor risk factors similar to others renal diseases, for this reason its necessary to search specific new biomarkers to help the nephrologist in the treatment decision. These molecules would have to be able to identify a group of patients with a poor prognosis, with a higher risk of progression to end stage kidney disease (ESKD) in which the benefit of early and aggressive treatment is clear. Proteomics approachs represents an accessible and reproducible tool that allows us identify in blood and urine peptides related to biological processes. In the present study, proteomic techniques have been applied through mass spectrometry to identify a profile of peptides in blood, plasma and urine, associated with clinical, biochemical and histological parameters in a cohort of patients with primary IgAN and IgAN with C4d deposits. As a result, we found C4a, bradykinin, A1AT and B2 microglobulin serum peptides, and A1AT and UMOD urinary peptides differentiated patients with IgAN from control subjects; and were associated with worse renal outcomes: double of creatinine, glomerulosclerosis and tubulointerstitial damage/tubular atrophy. In addition, in the IgAN with C4d deposits study, we found higher urinary and plasma levels of eptides A1AT and C4a in IgAN C4d positive patients than C4d negative. In addition, histological lesions glomerulosclerosis and endocapillary hypercellularity lesions were significantly associated with IgAN C4d positive group, a worse renal prognosis group. A potential cut-off was defined that discriminated correctly between groups. We propose the use of proteomic techniques in the search for markers of poor renal prognosis in IgAN can help to establish an early diagnosis and identify a group of patients with a poor renal evolution and tributary of more aggressive therapies.