Universitat Autònoma de Barcelona
Azagra Ledesma, Rafael
Selva O'Callaghan, Albert
2021-07-09
113 p.
1. RESUM ESTRUCTURAT. 1.1 Motiu. En els últims anys, s'ha produït un increment notable de l'interès de les dones i de les parelles en la identificació de la finestra fèrtil amb el propòsit de concebre. La determinació d'un paràmetre bioquímic preovulatorio que permeti identificar de forma precisa i anticipada el moment en què es produeix l'ovulació, possibilitaria la identificació de la finestra de fertilitat combinada d'una manera més precisa. 1.2 Hipòtesi de treball. L'enzim lisozima, un agent pertanyent a la immunitat general de l'organisme, amb d'altres enzims que estan presents en el Moc Cervical (MC), es comporten com a paràmetres bioquímics preovulatoris que poden identificar de forma precisa i anticipada el moment en que es produeix l'ovulació. 1.3 Objectius. Objectiu Principal - Analitzar les variacions de l'enzim lisozima a MC durant els primers dies de l'cicle menstrual. Objectius Secundaris - (1) Analitzar les variacions de les proteïnes presents en el MC durant els primers dies de l'cicle menstrual. - (2) Identificar possibles biomarcadors de l'ovulació. - (3) Detectar la presència de cèl·lules precursores de Z a les mostres de MC observades a l'microscopi òptic i analitzar possibles diferències en la composició proteica de les mostres en les que està present. 1.4 Material i mètodes Es recullen mostres de MC, procedents de la llum del canal cervical, de dones en edat reproductiva, en tres dies diferents de el mateix cicle. Les mostres han estat analitzades i classificades en primer lloc per microscòpia òptica. Posteriorment, es va realitzar l'anàlisi per espectrometria de masses d'alta resolució i anàlisi bioinformàtic per determinar els canvis in vivo de la composició proteica del MC. 1.5 Resultats principals. El MC va experimentar canvis cíclics en la seva composició biofísica que es van evidenciar amb canvis en els patrons cristal·logràfics observats a l'microscopi òptic. Així mateix, l'anàlisi proteòmic va revelar canvis en la composició proteica de l'MC durant el cicle. Les variacions en la composició proteica de les proteïnes de l'MC en la fase ovulatòria, van incloure un descens significatiu en l'abundància d'immunoglobulines i altres proteïnes implicades en la defensa. L'anàlisi proteòmica de les mostres de el present estudi ha permès la identificació de 48 proteïnes. De les quals 26 serien susceptibles de convertir-se en paràmetres preovulatoris, en biomarcadors de l'ovulació. L'estudi microscòpic va permetre la identificació de cèl·lules precursores Z produïdes per les glàndules de l'istme uterí. 1.6 Conclusions. Conclusió sobre l'objectiu principal. - L'enzim lisozima va experimentar un descens significatiu en la seva abundància en MC durant els primers dies de l'cicle menstrual. Conclusió sobre l'objectiu secundari 1. - L'anàlisi de les variacions de l'abundància de les proteïnes cervicals durant els primers dies de l'cicle menstrual, va evidenciar un descens significatiu en l'abundància de divuit proteïnes i un increment significatiu en vuit proteïnes. Conclusió sobre l'objectiu secundari 2. - La lisozima, un agent pertanyent a la immunitat general de el cos, present al MC, podria considerar-se, juntament amb altres, un possible biomarcador de l'ovulació. Conclusió sobre l'objectiu secundari 3. - Es detecta la presència de cèl·lules precursores de Z en una de les mostres de MC observades a l'microscopi òptic. Es van identificar diferències en la composició de les mostres. En el grup de les mostres en què eren presents les cèl·lules precursores de Z es va evidenciar la presència de proteïnes la abundància estava significativament elevada.
1. RESUMEN ESTRUCTURADO. 1.1 Motivo. En los últimos años, se ha producido un notable incremento del interés de las mujeres y de las parejas en la identificación de la ventana fértil con el propósito de concebir. La determinación de un parámetro bioquímico preovulatorio que permita identificar de forma precisa y anticipada el momento en el que se produce la ovulación, posibilitaría la identificación de la ventana de fertilidad combinada de un modo más preciso. 1.2 Hipótesis de trabajo. La enzima lisozima, un agente perteneciente a la inmunidad general del organismo, junto a otros enzimas que están presentes en el Moco Cervical (MC), se comportan como parámetros bioquímicos preovulatorios que pueden identificar de forma precisa y anticipada el momento en el que se produce la ovulación. 1.3 Objetivos. Objetivo Principal - Analizar las variaciones de la enzima lisozima en MC durante los primeros días del ciclo menstrual. Objetivos Secundarios - (1) Analizar las variaciones de las proteínas presentes en el MC durante los primeros días del ciclo menstrual. - (2) Identificar posibles biomarcadores de la ovulación. - (3) Detectar la presencia de células precursoras de Z en las muestras de MC observadas al microscopio óptico y analizar posibles diferencias en la composición proteica de las muestras en las que está presente. 1.4 Material y métodos Se recogen muestras de MC, procedentes de la luz del canal cervical, de mujeres en edad reproductiva, en tres días diferentes del mismo ciclo. Las muestras han sido analizadas y clasificadas en primer lugar por microscopía óptica. Posteriormente, se realizó el análisis por espectrometría de masas de alta resolución y el análisis bioinformático para determinar los cambios in vivo de la composición proteica del MC. 1.5 Resultados principales. El MC experimentó cambios cíclicos en su composición biofísica que se evidenciaron con cambios en los patrones cristalográficos observados al microscopio óptico. Así mismo, el análisis proteómico reveló cambios en la composición proteica del MC durante el ciclo. Las variaciones en la composición proteica de las proteínas del MC en la fase ovulatoria, incluyeron un descenso significativo en la abundancia de inmunoglobulinas y otras proteínas implicadas en la defensa. El análisis proteómico de las muestras del presente estudio ha permitido la identificación de 48 proteínas. De las cuales 26 serían susceptibles de convertirse en parámetros preovulatorios, en biomarcadores de la ovulación. El estudio microscópico permitió la identificación de células precursoras Z producidas por las glándulas del istmo uterino. 1.6 Conclusiones. Conclusión sobre el objetivo principal. - La enzima lisozima experimentó un descenso significativo en su abundancia en MC durante los primeros días del ciclo menstrual. Conclusión sobre el objetivo secundario 1. - El análisis de las variaciones de la abundancia de las proteínas cervicales durante los primeros días del ciclo menstrual, evidenció un descenso significativo en la abundancia de dieciocho proteínas y un incremento significativo en ocho proteínas. Conclusión sobre el objetivo secundario 2. - La lisozima, un agente perteneciente a la inmunidad general del cuerpo, presente en el MC, podría considerarse, junto con otros, un posible biomarcador de la ovulación. Conclusión sobre el objetivo secundario 3. - Se detecta la presencia de células precursoras de Z en una de las muestras de MC observadas al microscopio óptico. Se identificaron diferencias en la composición de las muestras. En el grupo de las muestras en las que estaban presentes las células precursoras de Z se evidenció la presencia de proteínas cuya abundancia estaba significativamente elevada.
1. STRUCTURED SUMMARY. 1.1 Rationale. In recent years, there has been a notable increase in the interest of women and couples in identifying the fertile window for the purpose of conceiving. The determination of a pre-ovulatory biochemical parameter that allows the precise and anticipated identification of the moment in which ovulation occurs would allow the identification of the combined fertility window to be more precise. 1.2 Hypothesis. The enzyme lysozyme, an agent belonging to the general immunity of the body, together with other enzymes that are present in the Cervical Mucus (MC), behave as pre-ovulatory biochemical parameters that can identify precisely and in advance the moment in which the ovulation occurs. 1.3 Objectives. Main objective - Analyze the variations in the abundance of the lysozyme enzyme in MC during the first days of the menstrual cycle. Secondary Objectives - (1) Analyze the variations of the proteins present in the MC during the first days of the menstrual cycle. - (2) Identify possible biomarkers of ovulation. - (3) Detect the presence of Z precursor cells in MC samples observed under the light microscope and analyze possible differences in the protein composition of the samples in which it is present. 1.4 Material and Methods. MC samples are collected from the lumen of the cervical canal from women of reproductive age, on three different days of the same cycle. The samples have been analyzed and classified first by light microscopy. Subsequently, high resolution mass spectrometry analysis and bioinformatic analysis were performed to determine the in vivo changes of MC protein composition. 1.5 Main results. The MC underwent cyclical changes in its biophysical composition that were evidenced by changes in the crystallographic patterns observed under the light microscope. Additionally, the proteomic analysis revealed changes in the protein composition of MC during the cycle. Variations in the protein composition of MC proteins in the ovulatory phase included a significant decrease in the abundance of immunoglobulins and other proteins involved in defense. The proteomic analysis of the samples of the present study has allowed the identification of 48 proteins. Of which 26 may be capable of becoming pre-ovulatory parameters, biomarkers of ovulation. The microscopic study allowed the identification of precursor Z cells produced by the glands of the uterine isthmus. 1.6 Conclusions. Conclusion on the main objective. - The enzyme lysozyme experienced a significant decrease in its MC's abundance during the first days of the menstrual cycle. Conclusion on secondary objective 1. - The analysis of the variations in the abundance of cervical proteins during the first days of the menstrual cycle, showed a significant decrease in the abundance of eighteen proteins and a significant increase in eight proteins. Conclusion on secondary objective 2. - Lysozyme, an agent belonging to the general immunity of the body, present in CM, could be considered, along with others, a possible biomarker of ovulation. Conclusion on secondary objective 3. - The presence of Z precursor cells is detected in one of the MC samples observed under the light microscope. Differences in the composition of the samples were identified. In the group of samples in which the Z precursor cells were present, the presence of proteins whose abundance was significantly high was evidenced.
Moc cervical; Moco cervical; Cervical mucus; Ovulació; Ovulación; Ovulation; Fertilitat; Fertilidad; Fertility
00 - Ciencia y conocimiento. Investigación. Cultura. Humanidades
Ciències de la Salut
