Evaluación funcional y daño progresivo en el sistema vestibular

Abstract

Esta tesis ha establecido la relación entre la función vestibular valorada a partir de los reflejos vestibulares anti gravitacionales air‐right y tail‐lift con el número de células ciliadas de tipo I (HCI) y II (HCII) en los epitelios sensoriales tras lesiones ototóxicas por IDPN. Los resultados demostraron una mayor sensibilidad de las HCI en comparación con las HCII a la ototoxicidad, así como una resistencia relativa del sáculo en comparación con la cresta y el utrículo. Comparando las medidas funcionales con los recuentos de células, se observó que la pérdida del reflejo de tail‐lift se asocia mejor con la población de HCI que con la de HCII. Por el contrario, la mayor parte de las HCI en la cresta y el utrículo se perdieron antes de que aumentaran los tiempos de air‐right. Por lo tanto, los datos sugieren que estos reflejos dependen de la función de poblaciones no idénticas de HC vestibulares.

En esta tesis también se ha realizado el desarrollo y la caracterización de modelos de toxicidad vestibular crónica por estreptomicina en rata. En dos modelos diferentes, con una o dos inyecciones diarias de estreptomicina, se ha podido demostrar que las primeras fases de la toxicidad causada por su exposición crónica son similares a las demostradas por el tóxico experimental IDPN. Ésta se caracteriza por la pérdida de adhesión entre las células ciliadas y las terminales adyacentes, incluyendo un desacoplamiento sináptico. Además, la fase inicial se asocia al inicio de la pérdida funcional, y es reversible. También se ha demostrado en estreptomicina que, en caso del mantenimiento del estrés tóxico, se produce una pérdida de células ciliadas mediante, al menos parcialmente, por extrusión.

Por otro lado, se ha estudiado que en algunos epitelios vestibulares humanos expuestos a situación de estrés, concretamente por la presencia de un schwannoma vestibular cercano, hay también una pérdida de adhesión celular de las células ciliadas con las aferentes.

Por último, se han obtenido datos de RNA‐seq para estudiar los efectos de la toxicidad crónica sobre la expresión génica en epitelios y ganglios vestibulares, comparando los diversos modelos disponibles (IDPN‐rata, IDPN‐ratón, estreptomicina‐rata). La finalidad ha sido identificar los principales programas de expresión génica implicados en la respuesta de los tejidos vestibulares a la agresión tóxica crónica. Posteriormente, se ha recogido numerosos datos de RT‐PCR y de inmunohistoquímica para corroborar e interpretar los resultados de RNA‐seq.