El paper de p27 a la regulació de la via de Notch

Abstract

Partint dels resultats previs obtinguts per aquest grup d’investigació, es planteja la següent hipòtesi de treball: “La proteïna p27 és un regulador de la via de Notch. Aquesta regulació es realitzaria, principalment, controlant la transcripció de diferents components d’aquesta ruta de senyalització, com per exemple el lli-gand Jag1 o el receptor Notch2. Tanmateix, es planteja que p27 podria regular l’expressió d’altres components d’aquesta via”.

L’objectiu general d’aquesta tesi és validar aquesta hipòtesi de treball en diferents línies cel·lulars. Per tal de fer-ho, s’han establert els se-güents objectius concrets:

1. Validar els resultats previs obtinguts en un microarray d’expressió realitzats en cèl·lules MEF deficients en p27 vs. cèl·lules MEF control. En aquest microarray s’observava que els les cèl·lules MEFp27KO tenien nivells mes alts de mRNA de diferents components de la via de Notch respecte als controls. 2. Analitzar si la pèrdua de p27 indueix també un increment dels nivells de proteïna dels diferents components de la via de Notch. 3. Generar a partir de cèl·lules de càncer colorectal HCT116, clons p27KO mitjançant la tècnica CRISPR/CAS9 i analitzar en aquestes cèl·lules l'expressió de diferents components de la via de Notch, tant a nivell de mRNA com de proteïna.

4. Analitzar el paper de p27 en l’expressió, tant a nivell de mRNA com de proteïna, de diferents elements de la via de Notch en lí-nies cel·lulars derivades de leucèmies. 5. Estudi del paper dels complexes E2F4/p130 i CDK-Ciclina en la regulació de la via de Notch, seguint el model pre-establert en aquest grup. 6. Identificar quins dels components d’aquesta via estan directa-ment regulats per p27. 7. Establir els mecanismes moleculars que participen en aquesta regulació.