Establecimiento de metodologías analíticas para la separación y caracterización de péptidos y proteínas de interés terapéutico

Autor/a

Benavente Moreno, Fernando J. (Julián)

Director/a

Barbosa Torralbo, José

Sanz Nebot, María Victoria

Data de defensa

2003-10-02

Pàgines

341 p.



Departament/Institut

Universitat de Barcelona. Departament de Química Analítica

Resum

El objetivo final de esta tesis doctoral ha sido el establecimiento de metodologías analíticas para la separación y caracterización de mezclas complejas de péptidos y proteínas de gran interés terapéutico, empleando para ello la Cromatografía de Líquidos (LC) y la Electroforesis Capilar (CE) con detección por Espectrofotometría Ultravioleta (UV) y sus acomplamientos a la Espectrometría de Masas (MS). Este objetivo principal engloba otros más concretos que se detallan a continuación: * Desarrollar modelos que describan el comportamiento cromatográfico y electroforético de sustancias peptídicas presentes en mezclas complejas, con la finalidad de poder predecir, a partir de un reducido número de medidas experimentales, las condiciones para obtener una separación óptima de estos analitos. Se establecen dos tipos de modelos: - Modelos que explican el comportamiento cromatográfico de los analitos en función de la polaridad de la fase móvil. - Modelos que explican el comportamiento cromatográfico y electroforético de los analitos ionizables en función del pH de la fase móvil cromatográfica o del electrolito utilizado para la separación electroforética, las constantes de disociación de los analitos estudiados y los coeficientes de actividad. * Determinar mediante los modelos anteriores los valores de pKa, en medio acuoso o hidroorgánico, de las sustancias analizadas. * Utilizar la Cromatografía de Líquidos acoplada a la Espectrometría de Masas con Ionización por Electrospray (LC-ESI-MS) para la separación y caracterización de las sustancias presentes en crudos de síntesis de hormonas peptídicas de gran interés terapéutico. Proponer las condiciones de separación óptimas para una posterior purificación por LC a escala preparativa de la hormona peptídica sintetizada y para identificar las impurezas presentes en las mezclas.

Paraules clau

Pèptids; Péptidos; Peptides; Proteïnes; Proteínas; Proteins; Separació (Tecnologia); Separación (Tecnología); Separation (Technology); Cromatografia de líquids; Cromatografía líquida; Liquid chromatography; Electroforesi capil·lar; Electroforesis capilar; Capillary electrophoresis; Espectrofotometria; Espectrofotometría; Spectrophotometry; Espectrometria de masses; Espectrometría de masas; Mass spectrometry; Terapèutica; Terapéutica; Therapeutics

Matèries

543 - Química analítica

Àrea de coneixement

Ciències Experimentals i Matemàtiques

Documents

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42.08Mb

 

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