Estudio del efecto antiasmático de cacao nativo de Perú en un modelo experimental en rata

Abstract

[spa] Debido al incremento sostenido de la prevalencia del asma y la presencia de fenotipos graves, resulta de interés el desarrollo de modelos animales que permitan estudiar nuevos tratamientos y coadyuvantes. En los últimos años, el cacao ha demostrado influir en el sistema inmunitario, modificando la composición de linfocitos y la producción de anticuerpos y citocinas.

En base a estos factores, el objetivo de la presente tesis ha sido establecer el efecto antiasmático del cacao, en particular de cuatro cacaos nativos del Perú procedentes de distintas regiones del país: Blanco de Piura (BPC), Amazonas Perú (APC), Criollo de Montaña (CMC) y Chuncho (CCC). Para lograr este objetivo, se desarrolló un modelo de asma alérgica que permitiera la inducción y la cuantificación objetiva de una respuesta anafiláctica utilizando ovoalbúmina como alérgeno y alum y toxina Bordetella pertussis como adyuvantes. Paralelamente se determinaron los compuestos bioactivos de los cacaos y se estudió el efecto in vitro en células del sistema inmune, macrófagos peritoneales y linfocitos del bazo. Los resultados mostraron una mayor concentración de polifenoles, metilxantinas, capacidad antioxidante y efecto antiinflamatorio en los cacaos Amazonas Perú y Criollo de Montaña, por lo que fueron seleccionados para su estudio en el modelo de asma alérgica desarrollado.

A continuación, se determinó el efecto de una dieta enriquecida al 10% de cacao Amazonas Perú, Criollo de Montaña o un cacao ordinario no autóctono en el modelo de asma alérgica establecido. Los resultados demuestran que las dietas ricas en cacao son capaces de reducir la síntesis de anticuerpos asociados a la respuesta inmunitaria Th2, sin embargo, el cacao ordinario mostró un efecto mayor que los cacaos nativos, siendo capaz de reducir la concentración de IgE sistémica y respiratoria. La dieta con Criollo de Montaña disminuyó la concentración de IgE en lavado broncoalveolar, con una tendencia en suero, y la dieta con Amazonas Perú solo mostró un cierto efecto a nivel respiratorio. Resultados similares se observaron en la concentración de proteasa mastocitaria II, indicativa de la degranulación mastocitaria. Las tres dietas ricas en cacao redujeron la producción de IgG1 sistémica y eosinófilos y leucotrienos en la vía respiratoria de forma similar, mientras que la dieta con Amazonas Perú mostró un efecto mayor que el resto de las dietas en la reducción de IgG2a. Las dietas con cacao Criollo de Montaña y cacao ordinario, pero no dieta con Amazonas Perú, disminuyeron la concentración de IgA mucosal.

Por consiguiente, los cacaos fueron capaces de paliar la respuesta inmunitaria Th2, especialmente la síntesis de IgE y la degranulación de los mastocitos, aunque se observaron diferencias entre los cacaos que no se pueden atribuidos a un solo compuesto bioactivo, debiendo influir tanto el contenido en teobromina como la concentración y perfil de flavonoides de cada cacao, que varía según su origen.

[eng] Due to the sustained increase in the prevalence of asthma and the presence of severe phenotypes, the development of animal models that allow the study of new treatments and adjuvants, such as cocoa, which in recent years has been shown to influence the immune system, is of interest.

Based on these factors, the objective of this thesis has been to establish the anti-asthmatic effect of four native Peruvian cocoas from different regions of the country: Blanco de Piura (BPC), Amazonas Peru (APC), Criollo de Montaña (CMC) and Chuncho (CCC).

To achieve this, an allergic asthma model was developed that would allow the induction and objective quantification of an anaphylactic response using ovalbumin as allergen. At the same time, the bioactive compounds of cocoa were determined and the in vitro effect on immune cells was studied. The results showed a higher concentration of polyphenols, methylxanthines, antioxidant capacity and anti-inflammatory effect in Amazonas Peru and Criollo de Montaña cocoas.

Next, the effect of diets enriched with 10% of these cocoas or a non-native ordinary cocoa was determined in the model of allergic asthma. The results show that cocoa diets are able to reduce the synthesis of antibodies associated with the Th2 immune response, however, ordinary cocoa showed a greater effect than native cocoa, being able to reduce the concentration of systemic and respiratory IgE. The Criollo de Montaña diet decreased the concentration of IgE in bronchoalveolar lavage fluid, while the Amazonas Peru diet only showed a tendency. Similar results were observed in the concentration of mast cell protease II. All cocoa diets reduced the production of systemic IgG1 and eosinophils and leukotrienes in the respiratory tract similarly, while the diet with Amazonas Peru showed a greater effect in reducing IgG2a. The diets with Criollo de Montaña cocoa and ordinary cocoa decreased the concentration of mucosal IgA .

Therefore, the cocoas were able to palliate the Th2 immune response, although differences were observed between the cocoas, influencing both the theobromine content and flavonoid concentration and profile of each cocoa, which varies according to its origin.