Implicación de las ectoenzimas ectonucleósido trifosfato difosfohidrolasas (familia CD39) en mecanismos de progresión del cáncer de endometrio

Abstract

[spa] El cáncer de endometrio es una patología compleja en cuanto a su diagnóstico y tratamiento. El estudio de nuevas opciones diagnósticas y terapéuticas que aborde la heterogeneidad intra e intertumoral en este tipo de tumores resulta de especial interés. La adenosina trifosfato (ATP) y la propia adenosina activan una cascada de señalización (purinérgica) en el microambiente tumoral que se relaciona con fenómenos como la proliferación celular, la angiogénesis y la inmunosupresión, que permite al tumor evadir el sistema inmunitario. En esta Tesis hemos estudiado las ectonucleotidasas como principales enzimas reguladores de los niveles extracelulares de ATP y adenosina. Dos ectonucleotidasas, el tándem CD39-CD73, se han indentificado como las principales responsables de la acumulación de adenosina extracelular en los tumores y existen terapias antitumorales (principalmente inmunooncoterapias con anticuerpos monoclonales inhibidores) con estas enzimas como dianas. En el cáncer de endometrio su expresión también es elevada en el estroma. Sin embargo, no son las únicas ectoenzimas expresadas en el endometrio y ya se ha demostrado su papel en el endometrio funcional, no patológico. Nuestra hipótesis es que cambios en la expresión y actividad de las ectonucleotidasas endometriales juegan un papel la progresión tumoral en el cáncer de endometrio. El objetivo de la Tesis es esclarecer si la vía purinérgica, con las ectonucleotidasas como diana, debe valorarse como objetivo terapéutico en el cáncer de endometrio. Los principales objetivos son determinar la expresión y actividad de las familias de ectonucleotidasas en los diferentes tumores de endometrio, mediante experimentos de inmunomarcaje y actividad in situ, así como desarrollar modelos celulares de utilidad para el estudio de las ectonucleotidasas en el contexto del cáncer de endometrio. Los resultados confirman que cambios en la expresión de ectonucleotidasas se relacionan con la progresión e invasión tumorales y con el pronóstico de la enfermedad en mujeres que la padecen. De este estudio se concluye que dos ectonucleotidasas de la familia de las ectonucleótido trifosfato difosfohidrolasas (NTPDasas o familia CD39), NTPDasa2 y NTPDasa3 son relevantes en estos tumores. Así, la pérdida de NTPDasa2 en el estroma de la interfase tumor-miometrio se relaciona con el fenotipo invasivo de los tumores y NTPDasa3, en el componente epitelial tumoral, jugaría un papel supresor de tumores. Por otra parte, hemos generado herramientas moleculares para el estudio de estas proteínas expresándolas como proteínas de fusión en células de cáncer de endometrio y los estudios en cultivos 2D, en organoides (3D) y en un modelo in vivo en ratones nos han permitido definir mejor su papel en los tumores. A través de estudios de expresión génica mediante arrays de expresión, hemos identificado genes de proliferación y motilidad celulares directamente influidos por NTPDasa3. Demostramos que la sobreexpresión de NTPDasa3 provoca la disminución génica y proteica de algunas metaloproteinasas de matriz y de integrinas, fenómeno relacionado con la adopción de fenotipos migratorios de tipo ameboide. Además, esta Tesis contribuye a la mejora metodológica del estudio de las ectonucleotidasas en tejidos y células humanas, lo que supone un avance para el estudio de nuevos inhibidores con posible uso terapéutico en esta y otras patologías con alteraciones en la vía purinérgica.