Implementation of in vitro screening assays to test inflammation. Thrombosis and endothelial function on cells

Abstract

Four cellular models have been developed to implement and standardise in vitro methodology to monitor the effect of food compounds or extracts on anti-inflammatory system, on endothelial function and on anti-thrombotic response: <br/>1. Induction of inflammation: Monocytes THP-1 cells challenged with Lipopolysaccharides and tumour necrosis factor-alpha (TNF-&#61537;) protein release and mRNA expression were assessed. <br/>2. Induction of endothelial dysfunction: HAEC challenged with TNF-&#945; and vascular cell adhesion molecule-1 (VCAM-1) protein release and mRNA expression were determined. <br/>3. Assessment of endothelial function: HAEC were incubated with TNF-&#61537; and Insulin and mRNA expression of endothelial nitric oxide synthase (eNOS) was determined. <br/>4. Study of thrombotic effects: HAEC were pre-incubated with resveratrol and then, challenged with TNF-&#945; to assess the tissue factor (TF) protein and mRNA expression. <br/>Thus, these in vitro cellular models are valid systems for the study of compounds or food extracts on mechanisms involved in the pathogenesis of atherosclerosis.

S'han desenvolupat 4 models per estandarditzar metodologia in vitro per supervisar l'efecte de compostos o extractes d'aliments en un sistema antiinflamatori, en funció endotelial i resposta antitrombòtica. <br/>1. <br/> Inducció de la inflamació: Es van estimular monòcits THP-1 amb Lipopolisacàrids i avaluar l'expressió proteica i del mRNA del factor de necrosis tumoral alfa (TNF-&#61537;). <br/>Inducció de disfunció endotelial: Van estimular-se HAEC amb TNF-&#61537; i determinar l'expressió proteica i del mRNA de la mol·lècula d'adhesió vascular cel·lular (VCAM-1). <br/>Avaluació de la funció endotelial: Es van incubar HAEC amb TNF-&#61537; o Insulina i determinar l'expressió del mRNA de la endothelial nitric oxide synthase (eNOS). <br/>Estudi dels efectes trombòtics: Les HAEC van ser pre-incubades amb resveratrol i estimulades amb TNF-&#945; per avaluar l'expressió proteica i del mRNA del factor tissular. <br/>Aquests models cel·lulars in vitro són vàlids per estudiar compostos o extractes d'aliments sobre mecanismes implicats en la patogènesi de l'aterosclerosi.