Modulación del sistema inmune por el ácido docosahexanoico: Efecto sobre la célula dendrítica.

Abstract

El ácido docosahexaenoico, un PUFA omega-3, se ha relacionado con efectos inmunosupresores en linfocitos, monolitos y macrófagos pero no existían estudios sobre sus efectos en las células dendríticas (DCs). Por ello se diferenciaron en presencia de DHA monocitos hacia DCs. Las células tratadas con el ácido graso mostraron cambios fenotípicos divergentes en función del estadio de madurez de las mismas. Así, en estadio inmaduro, se produjeron incrementos de expresión de CD83, CD86, HLA-DR y CD36 y disminución de CD1a y CD80. Sin embargo, en estadio maduro, CD83, CD86 y HLA-DR sufrieron descensos en su expresión con respecto a los controles. CD80 y CD1a de nuevo presentaban una expresión disminuida y la de CD36 se encontraba aumentada. Al medir la capacidad de activación de la proliferación linfocitaria de estas células se encontró que esta se encontraba disminuida. La secreción de IL-10 e IL-12 también había disminuido. Este conjunto de efectos era dependiente de la concentración de DHA. El DHA era capaz de desarrollar algún tipo de efecto inmunosupresor en las DCs.<br/>Se realizaron experimentos similares con otros ácidos grasos: EPA, ácido linoleico (LA) y ácido oleico. Con EPA y LA se obtuvieron resultados similares a los mostrados por el DHA cualitativamente pero no cuantitativamente. El DHA era el ácido graso más potente y afectaba tanto al fenotipo como a la capacidad secretora de citocinas y activadora de la proliferación linfocitaria en DCs.<br/>Estos resultados eran similares a los obtenidos por otros autores en los tratamientos de DCs con activadores de PPAR&#947; lo cual sugería para el DHA una posible actuación a través de este receptor nuclear. Sin embargo, el hecho de que el DHA sea un activador de PPAR&#947; pobre en comparación con EPA, LA o Rosiglitazona sugirió la presencia de otras vías de activación. En concreto, RXR, con el cual se ha demostrado que el DHA es capaz de interactuar.<br/>Se trataron DCs con concentraciones en el rango nanomolar de 9cRA, un activador de RXR, obteniéndose que este retinoide era capaz de interferir en la maduración normal de la DC de forma que se obtenía resultados fenotípicos extraordinariamente similares a los producidos por el DHA. También la capacidad de estimulación de la proliferación linfocitaria estaba disminuida. En cambio, las DCs tratadas con 9cRA mostraron una secreción disminuida de IL-12 y normal de IL-10. <br/> La activación de PPAR&#947;:RXR simultáneamente a través de ambos monómeros ha sido relacionada con efectos aditivos, sinérgicos o complementarios en muchos tipos celulares. Se cree que esto es debido a la unión de moléculas coactivadoras complementarias al heterodímero. La adición simultánea de Rosiglitazona y 9cRA a las DCs mostró efectos fenotípicos aditivos indicando que probablemente 9cRa estaba actuando a través del heterodímero. Se realizaron experimentos similares combinando el DHA con 9cRA y el DHA con la Rosiglitazona. La combinación con Rosiglitazona mostró cambios mucho más importantes lo cual sugería que el DHA actuaba principalmente uniéndose a RXR en el heterodímero. <br/>Finalmente se añadió un inhibidor específico de PPAR&#947; a las células dendríticas: GW9662; el cual fue capaz de bloquear los efectos producidos por el DHA, la Rosiglitazona y el 9cRA. Además, el inhibidor por sí mismo alteraba por completo el proceso de maduración de las células dendríticas implicando que PPAR&#947; debe desarrollar un papel indispensable en el proceso de maduración de la DC y no solo actuar como un activador de la inmunosupresión y también que el DHA, probablemente, actúe a través del monómero RXR del heterodímero PPAR&#947;:RXR en las DCs.

<I>Docosahexaenoic Acid (DHA), an omega-3 PUFA, has been associated with immunosuppressive effects in lymphocytes, monocytes and macrophages, but there were no studies about its effects on dendritic cells (DCs). So human monocytes were differentiated to DCs in presence of growing concentrations of DHA. These cells displayed divergent changes in their phenotypes depending on the maturation stage, downregulating both their lymphoproliferative stimulation capacity and IL-12 and IL-10 secretion levels in mature stage. All these effects were DHA concentration dependent.<br/>We performed then similar experiments with other fatty acids: EPA, Linoleic Acid (LA), and Oleic Acid. With EPA and LA the results were similar to that shown by DHA in a qualitative manner but DHA was the most potent fatty acid affecting DC phenotype, lymphoproliferation activation capacity and cytokine secretion.<br/>The results obtained with DHA were similar to those obtained in DCs with PPAR&#947; ligands although DHA is considered a poor PPAR&#947; ligand compared to EPA, LA or Rosiglitazone. By the other side, theoretically, the PPAR&#947; heterodimer can be activated both by RXR and PPAR&#947; ligands. 9cRA, an RXR ligand, was tested at low concentrations in DCs. The results obtained were similar in phenotype and lymphoproliferative stimulation capacity to those shown by DHA treatments. However, mature 9cRA treated DCs secreted normally IL-10 with IL-12 inhibited.<br/> The simultaneous addition of 9cRA and Rosiglitazone on DCs displayed additive effects on DCs phenotype indicating that 9cRA was probably acting through PPAR&#947;:RXR. When DHA and 9cRA or Rosiglitazone were combined, the phenotypic changes were much more additive for Rosiglitazone with DHA than for 9cRA with DHA. This was strongly suggesting that DHA could act mainly activating RXR in the PPAR&#947; heterodimer.<br/>Finally, GW9662, an specific inhibitor of PPAR&#947;, blocked the effects unleashed by DHA, Rosiglitazone and 9cRA. Moreover, GW9662 by himself altered normal maturation phenotype on DCs implying that PPAR&#947; must fulfil a significant role in the DC maturation process moreover than the immunosuppression of the DC response and that DHA, probably, was acting through the RXR monomer of PPAR&#947; heterodimer in DCs.</i>