Cellular immunotherapy for B-cell lymphoma with B-cell lymphoma with NKT-cell agonists

Abstract

Las células NKT representan una pequeña población de linfocitos con especificidad única para antígenos glicolipídicos, presentados por el receptor CD1d presente, principalmente, en las células dendríticas. Estas células juegan un papel muy important en la respuesta inmune antitumoral ya que coordinan tanto el sistema inmune innato como adaptativo. Las células NKT pueden ser activadas por el lípido sintético α-galactosilceramida (α-GalCer), que estimula la secreción de citoquinas como el IFN-γ, IL-12, IL-4 e IL-17, contribuyendo a la activación de células dendríticas (CDs), NK, B y T. En este trabajo, se evaluó el efecto antitumoral de la combinación de CDs, células tumorales irradiadas y el agonista de células NKT α-GalCer en un modelo murino de linfoma B. La vacuna terapéutica formada por CDs, células tumorales y α-GalCer eliminó el linfoma B en todos los ratones tratados, y su eficacia fue superior a la de otras combinaciones que se testaron como controles, incluyendo α-GalCer, células tumorales con CDs y CDs con α-GalCer. La terapia indujo la generación de una respuesta inmune de memoria, además de ser tumor-específica. El perfil de citoquinas inducido por la vacuna terapéutica resultó ser una combinación de respuesta Th1, Th2 e IL-17. Además, el tratamiento incrementó el número de células NKT y NK en los ratones tratados, así como de células NKT, NK y T secretoras de IFN-γ. Nuestro modelo de linfoma B resultó ser dependiente de células NK, además de presentar activación de células B. La vacuna terapéutica compuesta por CDs, células tumorales y α-GalCer elimina eficazmente el linfoma B de forma terapéutica. El tratamiento induce una respuesta inmune de memoria y tumor-especifica, y está asociado a un incremento de células NKT y NK, así como de células NKT, NK y T secretoras de IFN-γ, y con la activación de células B.

Natural killer T (NKT) cells are a small population of lymphocytes with unique specificity for glycolipid antigens presented by non-polymorphic CD1d receptor on APC, mainly presented on dendritic cells (DCs). NKT cells play a central role in tumor immunology since they coordinate innate and adaptive immune responses. These cells can be activated with the prototypic lipid α-galactosylceramide (α-GalCer), stimulating IFN-γ production and cytokine secretion (eg, IL-12, IL-4, IL-17) that contribute to the enhancement of DC function and the induction of NK, B and T-cell activation. We evaluated the antitumor effect of a combination of DCs and irradiated tumor cells with the NKT cell agonist α-GalCer in a mouse model of B-cell lymphoma. The therapeutic vaccine consisting of DCs, tumor cells and α-GalCer was able to eradicate B-cell lymphoma in all treated mice, and was superior to any vaccine combination, including α-GalCer alone, irradiated tumor cells with DCs, and DCs with α-GalCer. Importantly, treated mice with the vaccine were resistant to a tumor rechallenge, suggesting the development of a memory immune response. In addition, the immune response was tumor-specific since all the mice were unable to reject a syngeneic A20 B-cell lymphoma. In addition to in vivo evaluation of the therapeutic vaccine, the cytokine profile induced by the treatment was evaluated, showing a combination of Th1 and Th2 cytokines together with IL-17. When we looked at effector cells, we observed that the vaccine induces a high NKT and NK-cell expansion, as well as a high increase of IFN-γ secreting NKT, NK and tumor-specific T cells. NK cells played a critical role in the antitumor effect observed after the therapeutic treatment and there was also an activation of B cells since IgG antibodies against tumor cells were found in treated mice. The therapeutic vaccine consisting of dendritic cells, tumor cells and α-GalCer efficiently eradicates B-cell lymphoma in a therapeutic setting. This immune response is long-lasting, tumor-specific, and it is associated with an expansion of NK and NKT cells, an increase of IFN-γ secreting NK, NKT and T cells and B-cell activation.