Aportaciones al estudio de la actividad antimicrobiana de los antisépticos y desinfectantes

Abstract

Las infecciones nosocomiales (IN) provocan una elevada morbilidad y mortalidad, una gran carga de trabajo para el personal y un elevado coste económico. El uso eficaz de los biocidas, antisépticos y desinfectantes, junto con la desinfección de los dispositivos médicos y de superficies, el lavado de manos y las técnicas de barrera, constituyen las medidas de prevención de dichas IN. <br/>El desarrollo de estudios sobre la actividad antimicrobina, que permitan la selección de productos biocidas eficaces puede suponer una importante mejora en la lucha contra las IN. <br/>Se estudió in vitro la actividad antimicrobiana del ácido peracético al 0.26% (Perasafe®) en comparación con el glutaraldehído alcalino al 2% (Cidex®), frente a Mycobacterium avium- Mycobacterium intracelulare (MAI), Mycobacterium tuberculosis H37Rv, Mycobacterium fortuitum y Mycobacterium chelonae. Perasafe® fue micobactericida y tuberculocida (factor de reducción ? 5 log10) en 20 min. de contacto; mientras que Cidex® lo fue en 30 min. de exposición. MAI fue la micobacteria más resistente. <br/>También demostramos la eficacia de Perasafe® en comparación con Cidex® para la desinfección de broncoscopios contaminados experimentalmente con M.tuberculosis H37Rv y MAI. Ambos productos consiguieron un factor de reducción ?5 tras 10 min. de contacto frente a M.tuberculosis, y tras 20 min. frente a MAI. Así pues, como demuestran los estudios in vitro y de "uso simulado", Perasafe®, es un desinfectante de alto nivel efectivo frente a micobacterias y constituye una posible alternativa al glutaraldehído alcalino al 2% en la desinfección de broncoscopios.<br/>Se evaluó la actividad antimicrobiana frente a M.tuberculosis H37Rv, MAI, M.kansasii y M.chelonae de Korsolex® AF. La concentración del 1% fue eficaz frente a todas las micobacterias ensayadas en 60 min. de contacto. Estos datos sugieren que los productos biocidas que contienen aminas podrían ser útiles en la desinfección intermedia y de alto nivel de los dispositivos médicos. <br/>Acinetobacter baumannii destaca por su habilidad para desarrollar y transmitir resistencias antimicrobianas y por ser un patógeno nosocomial emergente difícil de erradicar. Se estudiaron 9 cepas multirresistentes, con adquisición progresiva de la resistencia a los antibióticos betalactámicos aisladas en el transcurso de un brote epidémico. Para ello, se realizó un estudio de suspensión cuantitativo según el European Standard EN 1040. Todas las cepas de A.baumannii fueron sensibles a todos los antisépticos (Sterillium®, 2 formulaciones alcohólicas no comercializadas, Hibiscrub® y Clorina®) y desinfectantes evaluados (Virkon® e Instrunet superficies®). Se comprobó que la resistencia a múltiples antibióticos betalactámicos en cepas de A.baumannii no se asocia a resistencia o descenso de sensibilidad a los biocidas.<br/>Por otro lado, hemos analizado el espectro de actividad antimicrobiana de Virkon siguiendo las normativas AFNOR. Los resultados obtenidos demuestran que Virkon® al 1% es un desinfectante de bajo nivel por ser un biocida con efecto antimicrobiano rápido (5 min.) frente a bacterias vegetativas (gramnegativas y grampositivas), levaduras, virus y micobacterias no tuberculosas en ensayos cuantitativos de suspensión, pero únicamente bactericida en los ensayos con portagérmenes. <br/>Finalmente, se evaluó la eficacia de un compuesto clorado (Solprogel®) frente al VIH-1 y VHB. La actividad virucida del VIH-1 se estableció mediante un ensayo de infectividad en células MT-2 y la del VHB midiendo la inhibición de la actividad de la DNA polimerasa (DNA-P). En ambos casos, la actividad antimicrobiana de Solprogel® se comparó con la del dicloroisocianurato sódico (NaDCC). Solprogel® y NaDCC, a una concentración de 120 ppm y 100 ppm de cloro disponible, respectivamente, inhiben el VIH-1 en 5 min. de contacto. La DNA-P del VHB fue sensible a la inhibición por los dos desinfectantes, requiriendo 960 y 1.000 ppm de cloro disponible para Solprogel® (16%) y NaDCC, respectivamente y un tiempo de exposición mínimo de 2 min.

Nosocomial infections (NI) lead to a high morbidity and mortality, significant staff work-loads and a high economic cost. The effective use of biocides, antiseptics and disinfectants along with the disinfection of surfaces and medical devices, hand washing and barrier techniques make up the means of prevention of NI.<br/>The development of studies in antimicrobial activity, which allow for the selection of effective biocidal products, could lead to an important improvement in the fight against IN.<br/>In vitro studies were made of the antimicrobial activity of peracetic acid at 0.26% (Perasafe®) in comparison to the 2% alkaline glutaraldehyde (Cidex®) against Mycobacterium avium- Mycobacterium intracelulare (MAI), Mycobacterium tuberculosis H37Rv, Mycobacterium fortuitum and Mycobacterium chelonae. Perasafe® was mycobactericidal and tuberculocidal (reduction factor ? 5 log10) after 20 minutes of contact. For Cidex®, 30 minutes of exposure was required. MAI was the most resistant mycobacterium.<br/>We also demonstrated the effectiveness of Perasafe® compared to Cidex® for the disinfection of bronchoscopes experimentally contaminated with M. tuberculosis H37Rv and MAI. Both products achieved a reduction factor ? 5 after 10 minutes contact with M. tuberculosis and after 20 minutes with MAI. So, as demonstrated in in vitro studies and in simulated use, Perasafe® is a disinfectant with a high level of effectiveness against mycobacteria and would be a possible alternative to 2% alkaline gluteraldehyde for the disinfection of bronchoscopes.<br/>The antimicrobial activity of Korsolex® AF against M.tuberculosis H37Rv, MAI, M.kansasii and M. chelona was evaluated. After 60 minutes contact the 1% concentration was effective against all the mycobacteria studied. These data suggest that biocidal products that contain amines could be useful in the intermediate and high level disinfection of medical devices.<br/>Acinetobacter baumannii is noted for its ability to develop and transmit antimicrobial resistances and has become an emerging pathogenic nosocomial infection that is difficult to eradicate. Nine multi-resistant strains were studied. These had progressive acquisition of resistance to betalactamate antibiotics and were isolated during an epidemic outbreak. In this case, a quantitative suspension study according to European Standard EN 1040 was performed. All the strains of A. baumannii showed sensitivity to all the studied antiseptics (Sterillium®, two non-commercialised alcoholic formulations, Hibiscrub® and Clorina®) and disinfectants (Virkon® and Instrunet superficies®). This proved that resistance to multiple betalactamate antibiotics in strains of A. baumannii is not associated with resistance or decrease in sensitivity to biocidals.<br/>On the other hand, we also analysed the antimicrobial activity spectrum of Virkon® according to the AFNOR regulations. The results obtained demonstrate that Virkon® at 1% concentration is a poor disinfectant to be a rapid antimicrobial effect biocide (5 minutes) against vegetative bacteria (gram negatives and gram positives), yeasts, viruses and non-tuberculoid mycobacteria in quantitative suspension studies. It was only bactericidal in the studies using the germ-carrier method.<br/>Finally, the efficacy of a chloride compound (Solprogel®) against VIH-1 and VHB was evaluated. The virucidal activity against the VIH-1 was established by means of an infectivity study in MT-2 cells and for that of the VHB by measuring the inhibition of the DNA polymerase (DNA-P) activity. In both cases, the antimicrobial activity of Solprogel® was compared to that of sodium dichloroisocyanurate (SDIC). Solprogel® and SDIC at respective concentrations of 120 ppm and 100 ppm of available chlorine inhibited VIH-1 after 5 minutes of contact. The DNA-P of the VHB was sensitive to inhibition by both disinfectants, requiring 960 and 1,000 ppm of available chlorine for 16% Solprogel® and SDIC respectively, and a minimum exposure time of 2 minutes.