Estudi del valor pronostic de les poblacions limfocitaries T especifiques front el SARSCov2 en COVID19

Abstract

La pneumònia associada a COVID-19 es presenta amb dany pulmonar, ARDS (Síndrome de distres respiratori agut). L'empitjorament i la mort dels pacients es relaciona amb la híperactivació del sistema immunitari o "tormenta de citocines". Els mecanismes que la indueixen encara son desconeguts. Hi ha evidències de la implicació de la disregulació de la immunitat innata, ja que els pacients COVID presenten nivells elevats de IL-6 i lactat deshidrogenasa en sèrum. Així com de la implicació de la resposta de la immunitat adaptativa donat que les poblacions de limfòcits T, B i Natural Killer en sang perifèrica es troben molt disminuïdes als pacients greus.

L'estudi de la resposta immunitària adaptativa front el SARS-CoV-2 inclou l'estudi de la funció dels limfòcits B mitjançant la determinació dels anticossos específics generats del tipus IgA, IgG o IgM, front les proteïnes S, M o N del virus. I estudi de la resposta dels limfòcits T (LT)específics front el virus, mitjançant cultiu i estimulació amb pèptids vírics. La presència de limfòcits T específics front el virus es determina mitjançant marcadors de superfície que s'expressen als limfòcits T activats i/o limfòcits T memòria. Estudis recents estableixen que la majoria dels pacients presenten anticossos abans dels 14 dies de l'inici de la simptomatologia. El que reflecteix l'activació de la immunitat adquirida, defineix el punt de tall per a poder realitzar anàlisi de l'activació de limfòcits T Estudis han descrit que els pacients greus de COVID-19 presenten nombres absoluts baixos de NK, NKT, LTgammadelta i TCD8+, i una disminució en TCD4, CD8 efectores i memòria central, i associen l'increment en les poblacions Teffector/Tmemòria a una millor evolució (5). Altres marcadors alterats son l'expressió de HLA-DR+, CD38+ i PD-1 als LimfòcitsTCD8+ dels pacients respecte dels controls sans, i entre els pacients greus respecte dels sans. Aquests són tres marcadors d'activació que assenyalen la funció dels limfòcits TCD8 com a factors importants en la infecció per SARS-Cov-2

Estudis d'activació limfocitària mitjançant estimulació amb pèptids de SARS-Cov-2 estableixen una activació especifica de limfòcits TCD4+ front els pèptids de la proteïna spike als pacients COVID-19, que no s'observa als individus no exposats al virus. De forma semblant, s'ha descrit que els limfòcits T específics front SARS-Cov-2 presenten un perfil d'activació i memòria que inclou una major expressió de CD38 tant als limfòcits CD4+ com als CD8+ als pacients greus

Es determinaran les proporcions de les diferents subpoblacions de limfòcits T de memòria i el fenotip d'activació dels limfocits T dels pacients amb COVID-19 en el moment de l'ingres hospitalari respecte a controls sans.

Es compararan els nivells de paràmetres paraclinics, les proporcions de les diferents subpoblacions de limfocits T de memoria i el fenotip d'activació dels limfocits T entre pacients amb COVID-19 d'evolució moderada i els d'evolució severa, per tal de trobar una combinació de parametres que permeti predir l'evolució en el moment de l'ingrés hospitalari.

En la nostra cohort, no es van trobar els factors determinants de gravetat mes descrits

Es caracteritzarà la resposta dels limfocits de sang periférica de pacients que han tingut una evolució moderada i una evolució greu per respondre davant una reactivació per antígenes de SARS-CoV2 tant a nivell de fenotip cel·lular com de producció de citocines.

Els pacients que tindrán una evolucio greu tenen limfopenia deguda tant a limfocits T CD4 com a CD8, a mes a mes de una disminución significativa de monocits i basofils. Sembla que els mecanismes que ho desencadenen son comuns perque estan relacionades en aquests pacients greus

Els pacients que tindran una evolucio greu tenen un augment d'expressio de CD38 als monocits, i una disminución significativa de CD11a a les poblacions de memoria tant de CD4 com de CD8.

La neumonía asociada a COVID-19 se presenta con daño pulmonar, ARDS (Síndrome distres respiratorio agudo). El empeoramiento y muerte de los pacientes se relaciona con la híperactivación del sistema inmunitario o "tormenta de citocinas". Los mecanismos que la inducen son todavía desconocidos. Existen evidencias de la implicación de la disregulación de la inmunidad innata, ya que los pacientes COVID presentan niveles elevados de IL-6 y lactato deshidrogenasa en suero. Así como de la implicación de la inmunidad adaptativa dado que las poblaciones de linfocitos T, B y NK en sangre periférica están disminuidas a los pacientes graves. El estudio de la respuesta inmunitaria adaptativa frente al SARS-CoV-2 incluye el estudio de la función de los linfocitos B mediante la determinación de los anticuerpos específicos generados del tipo IgA, IgG o IgM, frente a las proteínas S, M o N del virus . Y estudio de la respuesta de los linfocitos T (LT) específicos frente al virus, mediante cultivo y estimulación con péptidos víricos. La presencia de linfocitos T específicos frente al virus se determina mediante marcadores de superficie que se expresan en los linfocitos T activados y/o linfocitos T memoria. Estudios recientes establecen que la mayoría de pacientes presentan anticuerpos antes de los 14 días del inicio de la sintomatología. Lo que refleja la activación de la inmunidad adquirida, define el punto de corte para poder realizar análisis de la activación de linfocitos T Estudios han descrito que los pacientes graves de COVID-19 presentan números absolutos bajos de NK, NKT, LTgammadelta y TCD8+, y una disminución en TCD4, CD8 efectores y memoria central, asociando el incremento en las poblaciones Teffector/Temmoria a una mejor evolución (5). Otros marcadores alterados son la expresión de HLA-DR+, CD38+ y PD-1 en los LinfocitosTCD8+ de los pacientes respecto a los controles sanos, y entre los pacientes graves respecto a los sanos. Estos son tres marcadores de activación que señalan la función de los linfocitos TCD8 como factores importantes en la infección por SARS-Cov-2 Estudios de activación linfocitaria mediante estimulación con péptidos de SARS-Cov-2 establecen una activación específica de linfocitos TCD4+ frente a los péptidos de la proteína spike a los pacientes COVID-19, que no se observa a los individuos no expuestos al virus. De forma similar, se ha descrito que los linfocitos T específicos frente a SARS-Cov-2 presentan un perfil de activación y memoria que incluye una mayor expresión de CD38 tanto en los linfocitos CD4+ como en los CD8+ en los pacientes graves Se determinarán las proporciones de las diferentes subpoblaciones de linfocitos T de memoria y el fenotipo de activación de los linfocitos T de los pacientes con COVID-19 en el momento del ingreso hospitalario respecto a controles sanos. Se compararán los niveles de parámetros paraclínicos, las proporciones de las diferentes subpoblaciones de linfocitos T de memoria y el fenotipo de activación de los linfocitos T entre pacientes con COVID-19 de evolución moderada y los de evolución severa, para encontrar una combinación de parámetros que permita predecir la evolución en el momento del ingreso hospitalario. En nuestra cohorte, no se hallaron los factores determinantes de gravedad más descritos Se caracterizará la respuesta de los linfocitos de sangre periférica de pacientes que han tenido una evolución moderada y una evolución grave para responder ante una reactivación por antígenas de SARS-CoV2 tanto a nivel de fenotipo celular como de producción de citoquinas. Los pacientes que tendrán una evolución grave tienen linfopenia debida tanto a linfocitos T CD4 como CD8, además de una disminución significativa de monocitos y basófilos. Parece que los mecanismos que lo desencadenan son comunes porque están relacionadas con estos pacientes graves Los pacientes que tendrán una evolución grave tienen un

Pneumonia associated with COVID-19 presents with lung damage, ARDS (Acute Respiratory Distress Syndrome). The worsening and death of patients is related to the hyperactivation of the immune system or "cytokine storm". The mechanisms that induce it are still unknown. There is evidence for the involvement of dysregulation of innate immunity, as COVID patients have elevated serum levels of IL-6 and lactate dehydrogenase. As well as the involvement of adaptive immunity given that the populations of T, B and NK lymphocytes in peripheral blood are decreased in severe patients. The study of the adaptive immune response against SARS-CoV-2 includes the study of the function of B lymphocytes by determining the specific antibodies generated of the IgA, IgG or IgM type, against the S, M or N proteins of the virus . And study of the response of specific T lymphocytes (LT) against the virus, through culture and stimulation with viral peptides. The presence of specific T lymphocytes against the virus is determined by surface markers that are expressed on activated T lymphocytes and/or memory T lymphocytes. Recent studies establish that the majority of patients present antibodies before 14 days from the onset of symptoms. What reflects the activation of acquired immunity, defines the cut-off point to be able to analyze the activation of T lymphocytes Studies have described that severe patients with COVID-19 have low absolute numbers of NK, NKT, LTgammadelta and TCD8+, and a decrease in TCD4, CD8 effectors and central memory, and associate the increase in Teffector/Tmemory populations with a better evolution (5). Other altered markers are the expression of HLA-DR+, CD38+ and PD-1 in TCD8+ Lymphocytes of patients compared to healthy controls, and among severe patients compared to healthy ones. These are three activation markers that point to TCD8 lymphocyte function as important factors in SARS-Cov-2 infection Studies of lymphocyte activation by stimulation with SARS-Cov-2 peptides establish a specific activation of TCD4+ lymphocytes against spike protein peptides in COVID-19 patients, which is not observed in individuals not exposed to the virus. Similarly, SARS-Cov-2-specific T lymphocytes have been described to exhibit an activation and memory profile that includes increased expression of CD38 on both CD4+ and CD8+ lymphocytes in severe patients The proportions of the different memory T-lymphocyte subpopulations and the T-lymphocyte activation phenotype of patients with the COVID-19 at the time of hospital admission compared to healthy controls will be determined. The levels of paraclinical parameters, the proportions of the different subpopulations of memory T lymphocytes and the T lymphocyte activation phenotype will be compared between patients with moderate evolution and those with severe evolution of COVID-19, in order to find a combination of parameters that allows predicting the evolution at the time of hospital admission. In our cohort, the most described determinants of severity were not found In our cohort, the most described determinants of severity were not found The response of the peripheral blood lymphocytes of patients who have had a moderate evolution and a severe evolution to respond to a reactivation by SARS-CoV2 antigens will be characterized both at the level of cellular phenotype and cytokine production. Patients who will have a severe evolution have lymphopenia due to both CD4 and CD8 T lymphocytes, in addition to a significant decrease in monocytes and basophils. It seems that the mechanisms that trigger it are common because they are related in these serious patients Patients who will have a severe evolution have increased expression of CD38 on monocytes, and a significant decrease of CD11a in both CD4 and CD8 memory populations. The markers of inflammation and lymphopenia are still the parameters independent of each other and decisive to determine the evolution of the severity of the disease