Universitat Autònoma de Barcelona
Universitat Autònoma de Barcelona. Programa de Doctorat en Bioquímica, Biologia Molecular i Biomedicina
La leucèmia mieloide aguda és un tipus de càncer originat en els progenitors hematopoètics que determina un stop maduratiu i una proliferació anormal de cèl·lules immadures atípiques. És una malaltia amb un perfil heterogeni, ja que estan involucrades una gran quantitat d'anomalies genètiques. La recerca actual està enfocada a oferir un tractament personalitzat en funció de les característiques moleculars de cada pacient. El receptor c-KIT és una proteïna transmembrana que es pot trobar mutada en les cèl·lules impulsores de les neoplàsies mieloides. La mutació més comuna és la D816V que condueix a una activació constitutiva del receptor i de les vies de senyalització. En el present estudi analitzem el perfil metabòlic mitocondrial de la mutació en dues línies cel·lulars mieloides. Hem trobat que la mutació KIT D816V provoca un augment en l'activitat mitocondrial associada a una elevada producció de superòxid que pot promoure inestabilitat genètica. Els canvis mitocondrials trobats s'han associat a la infraexpressió de BNIP3 que redueix l'autofàgia. Així mateix, hem trobat la via de mTOR constitutivament activa en cèl·lules mutades, una via que regula l'autofàgia. Finalment, els resultats suggereixen que l'expressió de BNIP3 es veu reduïda en pacients portadors de la mutació KIT. En la LMA, es troba habitualment una sobreexpressió del mRNA del factor de transcripció WT1. Fins ara, es coneix poc sobre els efectes que produeix. A partir de l’anàlisi d'expressió gènica en pacients, hem trobat gens l'expressió dels quals es veu alterada en funció de l'expressió de WT1, sent un d'ells SGK1 amb el que presenta una correlació inversa. A partir de models cel·lulars, hem mostrat una correlació inversa entre els nivells d'expressió de tots dos. També hem comprovat que la seva expressió afecta a la viabilitat cel·lular en condicions de privació de nutrients, mostrant un avantatge de supervivència de les cèl·lules que sobreexpresan WT1 o infraexpressen SGK1. Finalment, els nostres resultats suggereixen que hi ha una regulació coordinada i inversa entre els nivells de WT1 i SGK1 durant la diferenciació cel·lular.
La leucemia mieloide aguda es un tipo de cáncer originado en los progenitores hematopoyéticos que determina un stop madurativo y una proliferación anormal de células inmaduras atípicas. Es una enfermedad con un perfil heterogéneo, ya que están involucradas una gran cantidad de anomalías genéticas. La investigación actual está enfocada a ofrecer un tratamiento personalizado en función de las características moleculares de cada paciente. En el presente estudio, pretendemos analizar las alteraciones metabólicas utilizando dos modelos de líneas celulares con c-KIT mutado y muestras de LMA con sobreexpresión de WT1. El receptor c-KIT es una proteína transmembrana que se puede encontrar mutada en las células impulsoras de neoplasias mieloides. La mutación más común es la D816V que conduce a una activación constitutiva del receptor y de las vías de señalización. En el presente trabajo analizamos el perfil metabólico mitocondrial de la mutación en dos líneas celulares mieloides. Hemos encontrado que la mutación KIT D816V provoca un aumento en la actividad mitocondrial asociada a una elevada producción de superóxido que puede promover la inestabilidad genética. Los cambios mitocondriales encontrados se han asociado a la infraexpresión de BNIP3 que reduce la autofagia. Así mismo, hemos encontrado la via de mTOR constitutivamente activa en células mutadas, una vía que regula la autofagia. Finalmente, nuestros hallazgos sugieren que la expresión de BNIP3 se ve reducida en pacientes portadores de la mutación KIT. En LMA, se encuentra muy a menudo una sobreexpresión del mRNA del factor de transcripción WT1. Hasta ahora, se conoce poco sobre los efectos que produce. A partir de análisis de expresión génica en pacientes, hemos encontrado genes cuya expresión se ve alterada en función de la expresión de WT1, siendo uno de ellos SGK1 con el que tiene una correlación inversa. Usando modelos celulares, hemos demostrado una correlación inversa entre los niveles de expresión de ambos. También hemos demostrado que su expresión afecta a la viabilidad celular en condiciones de privación de nutrientes, mostrando una ventaja de supervivencia en las células que sobreexpresan WT1 o infraexpresan SGK1. Finalmente, nuestros hallazgos que hay una regulación coordinada e inversa entre los niveles de WT1 y SGK1 durante la diferenciación celular.
Acute myeloid leukemia is a type of cancer originating in hematopoietic progenitors that determines a maturational arrest and abnormal proliferation of atypical immature cells. It is a disease with a very heterogeneous profile since many genetic abnormalities are involved. Current research is focused on offering personalized treatment based on the molecular characteristics of each patient. In the present work, we aim to analyze metabolic alterations using two cell line models with mutated c-KIT and AML samples with WT1 overexpression. The c-KIT receptor is a transmembrane protein that can be found mutated in the cells that drive myeloid neoplasms. The most prevalent mutation is D816V, which causes a constitutive activation of the receptor and downstream signaling pathways. In the present work, we analyze the mitochondrial metabolic profile of the mutation in two myeloid cell lines. We have found that the KIT D816V mutation causes an increase in mitochondrial activity associated with a high production of superoxide that can promote genomic instability. The mitochondrial changes found have been associated with the downregulation of BNIP3 that reduces autophagy. Likewise, we have found the mTOR pathway constitutively active in mutated cells, a pathway that regulates autophagy. Finally, we have found that BNIP3 expression is reduced in patients carrying the KIT mutation. In AML, overexpression of the WT1 transcription factor mRNA is very often found. Until now, little is known about the effects that it produces. We have discovered genes whose expression is influenced by WT1 expression through gene expression analysis in patients. One of them is SGK1, with which it has an inverse correlation. We have shown an inverse correlation between their expression levels using cell models. Additionally, we have demonstrated how its expression impacts the ability of cells to survive in starving conditions, in cells that overexpress WT1 or downrexpress SGK1, demonstrating an advantage in survival. Lastly, we have demonstrated that during cell differentiation, WT1 and SGK1 levels are coordinately and inversely regulated.
LMA; WT1; C-KIT
00 - Ciencia y conocimiento. Investigación. Cultura. Humanidades
Ciències Experimentals
ADVERTIMENT. Tots els drets reservats. L'accés als continguts d'aquesta tesi doctoral i la seva utilització ha de respectar els drets de la persona autora. Pot ser utilitzada per a consulta o estudi personal així com en activitats o materials d'investigació i docència en els termes establerts a l'art. 32 del Text Refós de la Llei de Propietat Intel·lectual (RDL 1/1996). Per altres utilitzacions es requereix l'autorització prèvia i expressa de la persona autora. En qualsevol cas en la utilització dels seus continguts caldrà indicar de forma clara el nom i cognoms de la persona autora i el títol de la tesi doctoral. No s'autoritza la seva reproducció o altres formes d'explotació efectuades amb finalitats de lucre ni la seva comunicació pública des d'un lloc aliè al servei TDX. Tampoc s'autoritza la presentació del seu contingut en una finestra o marc aliè a TDX (framing). Aquesta reserva de drets afecta tant als continguts de la tesi com als seus resums i índexs.
